pi鉴别细胞 基本原理

书中某页的回答：

pi鉴别细胞 基本原理：活细胞能分解染色剂pi，活细胞的细胞膜具有选择透过性，能保证选择性地使物质出入细胞，维持细胞正常的生命活动。水溶性染色剂(pi)不是细胞所需败帆埋物质，因而不能通过活细胞的细胞膜。

细胞死亡后，细胞膜及其他生物膜的选择透过性丧失，溶于水中的物质(如pi)都可以通过，而使细胞核着色。

细胞死轿闷活的鉴定通常採用的是一察蚂些不能进入细胞内的染色剂来鉴定，活的不能进入，死的才能进入。

热心网友的回答：

答案c试题分析：活细胞的细胞膜具有选择透过性，能保证选择性地使物质出入细胞，维持细胞正常的生命活动。水溶性染色剂脊磨(pi)不是细胞所需物质，因而不能通过活细胞的细胞膜。

细胞死亡后，细胞膜及其他生物膜樱余斗的选择透过性丧失，溶于水中的物质(如pi)都可以通过，而使细胞核着色。所以c选项正确。a、毁并b、d选项错误。

考点： 考查细胞死活的鉴定。

点评： 细胞死活的鉴定通常採用的是一些不能进入细胞内的染色剂来鉴定，活的不能进入，死的才能进入。

水溶性染色剂（pi）能与核酸结合而使细胞核着色，因此，可将其应用于鉴别细胞的 死活．将细胞浸泡于一

然然丿的回答：

a、死细胞和活细胞的细胞膜结构相同，a错误；

b、染色剂pi对于活细胞来说是有害物质，细胞不会孙团吸收，b错误；

c、死细胞与活细胞的细胞膜成分含量行袜相同，c错误；

d、活细胞的细胞膜可以阻止对细胞档凯激有害的染色剂pi的进入，d正确．

故选：d．

这道题为什么选c？？急求

热心网友的回答：

不是选c吧。你向老师确认下吧，我选d。将pi注射到活细胞中，局迟春则细胞核会着色这不就说明活细胞没有分解旦答pi嘛；至于pi能染死细胞，不能染活细胞，说明有东西阻止pi进入活细胞，那就是细胞膜的桐耐阻止了。

pi染色流式细胞仪结果图分析，只是看细胞凋亡，多谢

网友的回答：

这个实验有几个问题：

在fsc ssc这个图上没有看到明显的细胞群，有可能是pmt电压没有设定好，或者是细胞因为处理的太过，都死了，成为碎片。

第二个图的pi染色，既然你说是要做凋亡检测，目前pi单染看凋亡，只有是测sub g1期。这个横座标应该设为线性而不是对数。

所以说你整个实验都设定错了。只有重做了。

水溶性染色剂pi，能与核酸结合而使细胞核着色，可将其应用于细胞死活的鉴别．细胞浸泡于一定浓度的pi中，

受不鸟的回答：

a、死细胞与活细胞的核酸结构是相同的，故a错误；

b、死细胞与活细胞的核酸含量也是相同的，故b错误；

c、染色剂pi对于活细胞来说是有害物质，细胞不会吸收，故c错误；

d、活细胞的细胞膜可以阻止对细胞有害的染色剂pi，故d正确．故选d．

怎么分析pi staining 细胞週期

回家种红薯去不的回答：

pi单染检测细胞週期。

原理：碘化丙啶(propidium ，简称pi)是一种双链dna的萤光染料。碘化丙啶和双链dna结合后可以产生萤光，并且萤光强度和双链dna的含量成正比。

细胞内的dna被碘化丙啶染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行dna含量测定，然后根据dna含量的分布情况，可以进行细胞週期和细胞凋亡分析。

操作步骤：1、对于悬浮细胞，直接离心收集细胞，弃上清，在
rmp下用预冷的pbs洗细胞两次；对于贴壁细胞，先用不含edta的的胰酶消化再离心收集细胞；

2、加入预冷的70%乙醇（pbs配製），于4℃固定过夜，或-20℃长期固定；

3、离心收集细胞，以1 ml预冷的pbs洗细胞一次，加入预冷的 pbs重悬细胞，调整细胞浓度为，取出100 ul细胞悬液，加入rnase a酶，使rnase a终浓度为1 mg/ml，混匀后37 ℃水浴30 min；

4、加入pi综合染色液，使pi终浓度为50 ug/ml，混匀，4℃冰箱避光储存；

目尼龙网过滤后，上机检测。

注意事项：1、细胞浓度一定要≧1×106/ml，特别是阴性对照管细胞量要大一些，以便样品电压调节；

2、必须保证被检测样品为单细胞悬液；

3、如果样品细胞为培养的贴壁细胞，将上清转入离心管（其中含有脱落的凋亡细胞），与不含edta的胰酶消化的细胞合併后离心收集细胞；

4、在细胞固定时一定要将细胞吹开，吹成单细胞悬液；

5、rnase与pi综合染液分开的原因是rnase的作用最适温度是37℃，而不是4℃，所以与教材有所不同；

6、pi综合染液不能用蒸馏水配，否则细胞全部溶解，造成结果不可靠；

过夜一般隔天就进行检测，如果想推迟几天测，那就储存在-20℃，有资料显示-20℃可以至少储存乙个月；

~75%的酒精都可以用于pi单染固定。

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