基本信息
- 英文名称：Succinyl-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-7-amido-4-methylcoumarin
- 中文名称：琥珀酰 - 甘氨酰 - 脯氨酰 - 亮氨酰 - 甘氨酰 - 脯氨酰 - 7 - 氨基 - 4 - 甲基香豆素
- 氨基酸序列：琥珀酰 - 甘氨酸 - 脯氨酸 - 亮氨酸 - 甘氨酸 - 脯氨酸 - 7 - 氨基 - 4 - 甲基香豆素
- 单字母序列：Suc-G-P-L-G-P-AMC
- 三字母序列：Suc-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-AMC
- 分子量：约 719.82 g/mol
- 分子式：C₃₅H₄₆N₆O₁₀
- CAS 号：72698-36-3
- 供应商：上海楚肽生物科技有限公司
结构信息
- N 端：琥珀酰基（Suc，丁二酰基）作为保护基团，增强底物稳定性。
- 氨基酸序列：由甘氨酸（Gly, G）、脯氨酸（Pro, P）、亮氨酸（Leu, L）组成重复序列（GPLGP），其中亮氨酸为疏水性氨基酸，可能影响酶的识别特异性。
- C 端：7 - 氨基 - 4 - 甲基香豆素（AMC）作为荧光报告基团，与脯氨酸通过肽键连接。AMC 在游离状态下受激发后可发出荧光（激发波长≈380 nm，发射波长≈440 nm）。
- 连接方式：各氨基酸通过肽键（-CO-NH-）连接，整体结构呈线性，AMC 基团为荧光信号输出端。
作用机理及研究进展
作用机理
- 作为基质金属蛋白酶（MMPs，如 MMP-2、MMP-9）的荧光底物，其氨基酸序列可被 MMPs 特异性识别并切割，释放游离的 AMC 基团，通过检测荧光强度变化定量酶活性。
- 琥珀酰基（Suc）可降低底物的非特异性降解，提高检测灵敏度；亮氨酸（Leu）的位置可能模拟细胞外基质（ECM）中 MMPs 的天然底物序列。
研究进展
- 主要用于MMPs 活性的体外检测，如肿瘤细胞侵袭、炎症反应或纤维化过程中 MMPs 的动态监测。
- 可作为工具化合物筛选 MMPs 抑制剂，用于抗肿瘤或抗纤维化药物研发。
- 相关研究涉及癌症（如乳腺癌、结直肠癌）中 MMPs 表达与肿瘤转移的关联分析。
溶解与保存
- 溶解：
- 粉末状态下可溶于 DMSO、DMF 等有机溶剂（建议浓度 1-10 mM），必要时用缓冲液（如 Tris-HCl, pH 7.4）稀释。
- 避免直接用水溶解（可能因疏水性氨基酸导致溶解性差）。
- 保存：
- 粉末：-20°C 或 - 80°C 避光保存，避免吸湿，保质期通常 2-3 年。
- 溶液：分装后 - 80°C 保存，避免反复冻融（建议短期使用可存于 - 20°C，最长 1 个月）。
相关多肽
- Suc-GPLGL-AMC：将亮氨酸（Leu）替换为亮氨酸类似物，用于研究 MMPs 对不同疏水氨基酸的特异性。
- Suc-LLVY-AMC：用于检测 caspase 活性的荧光底物（序列不同，报告基团相同）。
- Dabcyl-GPLGP-Edans：非荧光型共振能量转移（FRET）底物，通过供体 - 受体对监测酶切割。
相关文献
- Overall C M, et al. Matrix metalloproteinase substrate specificity: a combined experimental and computational analysis[J]. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Proteins and Proteomics, 2002, 1595(1-2): 40-65.
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