高难度八聚体锥形孔跨膜蛋白MspA在珀罗汀无细胞平台成功表达

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南京航空航天大学团队利用自主搭建的珀罗汀无细胞蛋白表达平台,成功实现了分枝杆菌孔蛋白MspA的高效体外合成,并确认其八聚体锥形孔道结构完整性与天然构象高度一致。

▶ 突破技术壁垒,破解跨膜蛋白表达难题

MspA蛋白作为典型的八聚体跨膜通道蛋白,可以为多种氨基酸替代保留高水平表达和通道活性,是通过定点诱变进行工程设计的理想选择,其独特的锥形孔道结构在材料和化学领域具有重要应用价值。传统细胞表达系统因跨膜蛋白的疏水性及多亚基自组装复杂性,常面临表达效率低、构象错误等问题,而珀罗汀自主研发的无细胞平台成功实现MspA八聚体跨膜蛋白的成功表达。

▶ 结构精准性获权威验证

该技术团队对体外表达的蛋白进行结构解析,结果显示,体外表达的MspA蛋白呈现典型的八聚体对称性,结构域与天然蛋白误差很小,关键功能位点均与文献报道一致。

▶ 平台技术赋能合成生物学创新

珀罗汀无细胞蛋白表达平台的突破性进展,不仅为跨膜通道蛋白、离子转运体等"难表达"膜蛋白提供了高效制备方案,更展现出在合成生物元件定制、人工细胞器构建等领域的应用潜力。

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来源南京航空航天大学团队

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