AT 488 NHS Ester（Alexa Fluor 488 NHS Ester）、AT 488 SE（Alexa Fluor 488 Succinimidyl Ester）和AT 488活性酯，这些都是指同一种类型的荧光染料——Alexa Fluor 488的活化形式。它们主要用于生物化学和细胞生物学实验中，用于标记蛋白质、抗体、肽段、寡核苷酸等生物分子。
Alexa Fluor 488 的基本特性
荧光波长：Alexa Fluor 488 是一种绿色荧光染料，其激发波长约为 495 nm，发射波长约为 519 nm。这种波长范围使其非常适合与荧光显微镜和流式细胞仪等设备配合使用。
荧光强度：它具有很高的荧光量子产率和光稳定性，即使在高浓度下也不会发生荧光猝灭。
水溶性：Alexa Fluor 488 本身是水溶性的，适合在水相环境中使用。
2. AT 488 NHS Ester（Alexa Fluor 488 NHS Ester）
化学结构：NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）酯是荧光染料的一种活化形式。NHS 酯基团可以与生物分子上的伯胺（-NH₂）发生反应，形成稳定的酰胺键。
用途：
蛋白质标记：通过与蛋白质的赖氨酸残基上的伯胺反应，将荧光染料共价连接到蛋白质上。例如，用于标记抗体、酶或其他蛋白质，以便在细胞实验中进行荧光成像。
肽段标记：可以标记含有伯胺的肽段，用于研究肽段的细胞摄取、定位和代谢。
寡核苷酸标记：虽然寡核苷酸本身不含伯胺，但可以通过化学修饰引入伯胺基团，然后与 AT 488 NHS Ester 反应进行标记。
反应条件：通常在弱碱性条件下（pH 7.2-8.5）进行反应，反应时间一般为 30 分钟到 2 小时不等，具体取决于目标分子的性质。
3. AT 488 SE（Alexa Fluor 488 Succinimidyl Ester）
化学结构：Succinimidyl Ester（琥珀酰亚胺酯）是 NHS 酯的另一种形式，其化学性质与 NHS 酯相似，也可以与伯胺反应。
用途：与 AT 488 NHS Ester 的用途相同，主要用于标记含有伯胺的生物分子。SE 是 NHS Ester 的另一种命名方式，本质上是同一种化学基团。
反应条件：与 NHS 酯相同，通常在弱碱性条件下进行反应。
AT 488 活性酯
定义：AT 488 活性酯通常是指带有 NHS 酯或 SE 基团的 Alexa Fluor 488 染料。因此，AT 488 NHS Ester 和 AT 488 SE 都属于 AT 488 活性酯的范畴。
通用性：活性酯是一种通用的术语，用于描述带有反应性基团（如 NHS 酯或 SE）的荧光染料。这些活性基团能够与生物分子上的特定官能团（如伯胺）发生反应，从而实现荧光标记。
5. 注意事项
反应效率：标记反应的效率取决于目标分子上伯胺的数量和可及性。如果目标分子的伯胺数量较少或被掩蔽，可能需要优化反应条件（如增加反应时间和染料浓度）。
标记比例：需要控制染料与目标分子的摩尔比，以避免过度标记。过度标记可能导致生物分子的功能丧失或聚集。
储存条件：AT 488 NHS Ester 和 SE 通常需要在低温（-20°C）和避光条件下保存，以防止染料降解。
QY小编zyl分享2025.4.23
