AT 488 NHS Ester（Alexa Fluor 488 NHS Ester）、AT 488 SE（Alexa Fluor 488 Succinimidyl Ester）和AT 488活性酯，这些都是指同一种类型的荧光染料——Alexa Fluor 488的活化形式。它们主要用于生物化学和细胞生物学实验中，用于标记蛋白质、抗体、肽段、寡核苷酸等生物分子。
Alexa Fluor 488 的基本特性
荧光波长：Alexa Fluor 488 是一种绿色荧光染料，其激发波长约为 495 nm，发射波长约为 519 nm。这种波长范围使其非常适合与荧光显微镜🔬和流式细胞仪等设备配合使用。
荧光强度：它具有很高的荧光量子产率和光稳定性，即使在高浓度下也不会发生荧光猝灭。
水溶性：Alexa Fluor 488 本身是水溶性的，适合在水相环境中使用。
2. AT 488 NHS Ester（Alexa Fluor 488 NHS Ester）
化学结构：NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）酯是荧光染料的一种活化形式。NHS 酯基团可以与生物分子上的伯胺（-NH₂）发生反应，形成稳定的酰胺键。
用途：
蛋白质标记：通过与蛋白质的赖氨酸残基上的伯胺反应，将荧光染料共价连接到蛋白质上。例如，用于标记抗体、酶或其他蛋白质，以便在细胞实验中进行荧光成像。
肽段标记：可以标记含有伯胺的肽段，用于研究肽段的细胞摄取、定位和代谢。
寡核苷酸标记：虽然寡核苷酸本身不含伯胺，但可以通过化学修饰引入伯胺基团，然后与 AT 488 NHS Ester 反应进行标记。
反应条件：通常在弱碱性条件下（pH 7.2-8.5）进行反应，反应时间一般为 30 分钟到 2 小时不等，具体取决于目标分子的性质。
3. AT 488 SE（Alexa Fluor 488 Succinimidyl Ester）
化学结构：Succinimidyl Ester（琥珀酰亚胺酯）是 NHS 酯的另一种形式，其化学性质与 NHS 酯相似，也可以与伯胺反应。
用途：与 AT 488 NHS Ester 的用途相同，主要用于标记含有伯胺的生物分子。SE 是 NHS Ester 的另一种命名方式，本质上是同一种化学基团。
反应条件：与 NHS 酯相同，通常在弱碱性条件下进行反应。
AT 488 活性酯
定义：AT 488 活性酯通常是指带有 NHS 酯或 SE 基团的 Alexa Fluor 488 染料。因此，AT 488 NHS Ester 和 AT 488 SE 都属于 AT 488 活性酯的范畴。
通用性：活性酯是一种通用的术语，用于描述带有反应性基团（如 NHS 酯或 SE）的荧光染料。这些活性基团能够与生物分子上的特定官能团（如伯胺）发生反应，从而实现荧光标记。
5. 注意事项
反应效率：标记反应的效率取决于目标分子上伯胺的数量和可及性。如果目标分子的伯胺数量较少或被掩蔽，可能需要优化反应条件（如增加反应时间和染料浓度）。
标记比例：需要控制染料与目标分子的摩尔比，以避免过度标记。过度标记可能导致生物分子的功能丧失或聚集。
储存条件：AT 488 NHS Ester 和 SE 通常需要在低温（-20°C）和避光条件下保存，以防止染料降解。
QY小编zyl分享2025.4.23
