基本信息
- 英文名称：T7 Tag Peptide TFA
- 中文名称：T7 标签肽三氟乙酸盐
- 氨基酸序列：MASMTGGQQMG
- 单字母序列：MASMTGGQQMG
- 三字母序列：Met - Ala - Ser - Met - Thr - Gly - Gly - Gln - Gln - Met - Gly
- 分子量：约 1223.4 Da
- 分子式：C₅₆H₉₀N₁₄O₁₅
- 等电点：约 9.0 - 9.5
- CAS 号：688805 - 40 - 5
- 供应商：上海楚肽生物科技有限公司
结构信息：T7 标签肽是一段短肽，通常以线性结构存在。其二级结构可能包含一些无规卷曲，N 端的甲硫氨酸（Met）是起始氨基酸，序列中的甘氨酸（Gly）使肽链具有较好的柔韧性，两个谷氨酰胺（Gln）重复可能在一定程度上影响肽链的折叠和空间构象。整体结构相对简单，易于与其他蛋白质融合表达，且不会对融合蛋白的结构和功能产生太大影响。
作用机理及研究进展
- 作用机理：T7 标签肽主要用于在蛋白质表达和纯化过程中作为标签。它可以与 T7 噬菌体基因 10 的翻译增强子序列融合，在 T7 噬菌体 RNA 聚合酶的作用下，能显著提高目的蛋白的表达水平。在纯化过程中，带有 T7 标签的融合蛋白可以通过与抗 T7 标签的抗体或特异性结合 T7 标签的亲和介质进行亲和层析，从而实现快速、高效的纯化。此外，T7 标签还可用于蛋白质的检测和定位，通过与荧光标记的抗 T7 标签抗体结合，可在细胞或组织水平对目标蛋白进行可视化分析。
- 研究进展：随着蛋白质工程技术的不断发展，T7 标签在蛋白质表达和纯化领域的应用越来越广泛。研究人员不断优化 T7 标签与目的蛋白的融合方式，以提高融合蛋白的表达量和稳定性。同时，也在开发更高效的基于 T7 标签的纯化方法和试剂，如新型的亲和层析介质，以提高纯化效率和纯度。此外，在一些蛋白质结构和功能研究中，T7 标签也被用于帮助确定蛋白质的亚细胞定位和相互作用蛋白，为深入了解蛋白质的生物学功能提供了有力工具。
溶解保存
- 溶解：T7 标签肽三氟乙酸盐通常易溶于水、PBS 缓冲液等极性溶剂。对于难溶的情况，可以适当加热或超声辅助溶解，但要注意避免温度过高或超声时间过长导致肽的结构破坏。也可尝试用少量的有机溶剂如二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基亚砜（DMSO）助溶，但需注意其对后续实验的影响。
- 保存：应将其保存在 - 20℃或更低温度的环境中，以防止肽的降解和氧化。如果是溶解后的溶液，建议分装保存，避免反复冻融，同时可添加适量的防腐剂如叠氮化钠（NaN₃），但要注意其对实验的潜在影响。在干燥状态下保存时，要确保密封良好，防止吸潮。
相关多肽：与 T7 标签肽相关的多肽包括其他常用的蛋白质标签肽，如 His - Tag（组氨酸标签）、GST - Tag（谷胱甘肽 - S - 转移酶标签）、Myc - Tag 等。这些标签肽在蛋白质表达、纯化和检测等方面都有各自的特点和应用优势，可根据不同的实验需求进行选择。例如，His - Tag 常用于通过金属螯合亲和层析纯化蛋白质，GST - Tag 可利用其与谷胱甘肽的特异性结合进行亲和纯化，Myc - Tag 则常用于蛋白质的免疫检测和定位。
相关文献
- Smith, D. B., & Johnson, K. S. (1988). Single - step purification of polypeptides expressed in Escherichia coli as fusions with glutathione S - transferase. Gene, 67(1), 31 - 40.
- Hochuli, E., Dobeli, H., & Schacher, A. (1987). New metal chelate adsorbent for recombinant protein purification. Journal of Chromatography A, 411, 177 - 184.
- Evan, G. I., Lewis, G. K., Ramsay, G., & Bishop, J. M. (1985). Isolation of monoclonal antibodies specific for human c - myc proto - oncogene product. Molecular and Cellular Biology, 5(12), 3610 - 3616.
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