土壤 DNA 提取试剂盒|茁彩生物

土壤 DNA 提取试剂盒|茁彩生物

产品简介:

本试剂盒能从多类土壤环境样本中纯化总DNA 。高效的裂解缓冲体系搭配研磨珠,可有效处理真菌、细菌等土壤中的各类微生物 。独特的腐殖酸去除剂,可去除土壤样本中的腐殖酸和其他抑制因子 。优化的 缓冲系统可使核酸高效结合到吸附柱上,能够从100-300 mg土壤样本中快速 、可靠地分离高质量完整的 基因组DNA,纯化后的DNA 适用于PCR 、酶切和杂交等下游分子生物学实验。

储存与运输:

Proteinase K 冰袋(wet ice)运输,-20℃保存;其它试剂室温运输,室温储存,有效期12个月。

产品组成:

使用前须知(请仔细阅读)

  1. 若 Buffer SA1 、Buffer SLB 、Buffer SGB 、Buffer SD出现沉淀,请于 60℃加热溶解,待恢复至室温后使用。
  2. 使用前请向 Buffer SP中加入21mL无水乙醇, 向Buffer PW中加入49mL无水乙醇,混匀后使用。

操作步骤

  1. 称取100-300mg(推荐 250 mg)的土壤样本至含有500mg研磨珠(1mm)的2mL离心管中;
  2. 向离心管中加入 800μL Buffer SA1 、15μL Proteinase K,涡旋振荡10min;
  3. 12,000 rpm( ~13,400×g)室温离心 5 min,吸取上清转移至一新的 2mL离心管中(上清中可能会存 在碎屑,吸入少量不影响提取产物纯度);
  4. 向离心管加入0.25倍上清体积的 Buffer SLB,涡旋混匀,冰浴 5min;
  5. 12,000 rpm( ~13,400×g)室温离心5min,吸取上清转移至一新的2mL离心管中,注意不要吸取到 沉淀;
  6. 向离心管中依次加入 0.25 倍上清体积 Buffer SGB,0.75 倍上清体积异丙醇(如上清体积600μL,需先加入150μLBuffer SGB 再加入 450μL 异丙醇) ,上下颠倒混匀;
  7. 将上一步的混合液全部转入 DNA Spin Column 中(每次加入量不超过 700 µL,若超过 700 µL 可分批加入),12,000 rpm(~13,400×g)室温离心 1 min,弃滤液,将 DNA Spin Column 放入 Collection tube中;
  8. 向 DNA Spin Column 中加入 600 μL Buffer SD,12,000 rpm(~13,400×g)室温离心 1 min,弃滤液,将 DNA Spin Column 放入 Collection tube 中;
  9. 向 DNA Spin Column 中加入 600 μL Buffer SP(使用前请确认已添加无水乙醇),12,000 rpm(~13,400 ×g)室温离心 1 min,弃滤液,将 DNA Spin Column 放入 Collection tube 中;
  10. 向 DNA Spin Column 中加入 600μL PW(使用前请确认已添加无水乙醇),12,000 rpm(~13,400×g)室温离心1min,弃滤液,将 DNA Spin Column 放入 Collection tube 中;
  11. 重复步骤 10;
  12. 将 DNA Spin Column 重新置于 Collection tube 后,12,000 rpm(~13,400×g)室温离心2min,取出DNA Spin Column 置于新的1.5mL 离心管上;
  13. 将 DNA Spin Column 开盖室温放置 5-10min,尽量使残留的乙醇挥发完全;
  14. 向 DNA Spin Column 的膜中央悬空加入50-100μL Buffer TE,室温静置2min,12,000 rpm(~13,400 ×g)室温离心 2min,收集 DNA 溶液。若要得到更高浓度的 DNA,也可以将第一次的洗脱液重新加 回至 DNA Spin Column 中,室温静置2min,12,000 rpm(~13,400×g)室温离心 2min,再次洗脱DNA。

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