上海富衡 | 实验室细胞培养箱爆菌的应对策略

细胞培养箱作为实验室细胞培养的核心设备,为细胞营造稳定适宜的生长环境。然而,一旦发生爆菌现象,不仅会导致细胞培养失败,还可能对整个实验室环境造成污染,影响后续实验。因此,迅速有效地解决细胞培养箱爆菌问题至关重要。

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一、全面清洁与消毒
  1. 移除与清理:一旦发现细胞培养箱爆菌,首先需将培养箱内所有细胞培养物、试剂及耗材全部移出。这些物品可能已受污染,若继续留在箱内,会成为新的污染源。同时,仔细清理箱内的冷凝水托盘、搁板等部件,因为这些地方容易积聚细菌和杂质。使用干净的湿布或海绵🧽擦拭,去除可见的污垢和水渍。
  2. 深度消毒:采用合适的消毒剂对培养箱内部进行全面消毒。常见消毒剂如 75% 乙醇、过氧乙酸、含氯消毒剂等都可选用,但需注意不同消毒剂的适用范围和使用方法。例如,75% 乙醇常用于表面擦拭消毒,使用时需确保擦拭全面且不留死角。过氧乙酸具有强氧化性,可有效杀灭各类细菌和芽孢,但需按照规定比例稀释后使用,且使用后要注意通风散味。对于培养箱的各个角落、内壁、门缝等部位,都要用消毒剂充分擦拭或喷雾消毒,确保消毒无遗漏。消毒后,关闭培养箱门,让消毒剂作用一段时间,以达到最佳消毒效果。

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二、针对性除菌处理
  1. 高温灭菌(适用于部分可耐受高温部件):对于培养箱中一些可拆卸且耐高温的部件,如部分金属搁板、托盘等,可采用高温高压灭菌的方法。将这些部件放入高压蒸汽灭菌锅中,在 121℃,15 - 20 分钟的条件下进行灭菌,可彻底杀灭细菌及其芽孢。灭菌后,待部件冷却至室温,再重新安装回培养箱,以确保这些部件完全无菌。
  2. 『紫外线』照射:『紫外线』具有杀菌作用,可在培养箱内部放置『紫外线』灯进行照射消毒。关闭培养箱门,开启『紫外线』灯,照射时间通常为 30 分钟至 1 小时。『紫外线』可破坏细菌的 DNA🧬 结构,从而达到杀菌目的。但需注意,『紫外线』对人体有害,在照射过程中人员应避免直视『紫外线』光源,并确保培养箱周围无人,防止『紫外线』对人体造成伤害。同时,『紫外线』穿透力较弱,对于一些遮挡部位可能消毒效果不佳,因此需结合其他消毒方法使用。
  3. 化学熏蒸:对于一些难以通过擦拭和『紫外线』照射彻底消毒的区域,可采用化学熏蒸的方法。常用的熏蒸剂如甲醛 - 高锰酸钾混合熏蒸。在培养箱内放置一个耐高温的容器,先加入适量高锰酸钾,再缓慢倒入甲醛溶液,迅速关闭培养箱门。甲醛与高锰酸钾反应会产生大量热和气体,释放出的甲醛气体具有强大的杀菌能力,可有效杀灭培养箱内各个角落的细菌。熏蒸时间一般为 12 - 24 小时,熏蒸结束后,需充分通风换气,待甲醛气味散尽后,再使用培养箱。由于甲醛具有毒性和刺激性,操作过程需在通风良好的环境中进行,并严格遵守安全操作规程。

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三、预防措施强化
  1. 严格日常清洁维护:建立规范的细胞培养箱日常清洁制度,定期清理冷凝水托盘,防止积水滋生细菌。每周至少用湿布擦拭培养箱内部一次,去除灰尘和杂质。同时,定期更换培养箱内的空气过滤器,确保进入培养箱的空气洁净无菌。一般每 3 - 6 个月更换一次过滤器,具体更换周期可根据实验室环境和使用频率进行调整。
  2. 规范操作流程:加强实验人员培训,严格规范细胞培养操作流程。在向培养箱内放置或取出细胞培养物时,必须在超净工作台内进行操作,并确保双手、器材等无菌。避免在培养箱附近进行易产生气溶胶的操作,如剧烈振荡培养瓶等,防止细菌通过空气传播进入培养箱。同时,减少培养箱门的开启次数和时间,降低外界细菌进入的机会。
  3. 定期检测监测:定期对培养箱进行微生物检测,可采用培养皿暴露法或棉签擦拭法取样,然后将样本接种到合适的培养基上进行培养,观察是否有细菌生长。建议每月进行一次检测,以便及时发现潜在的污染问题。此外,可在培养箱内放置生物指示剂,如嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢条,定期进行灭菌效果监测,确保培养箱内部始终保持无菌状态。

实验室细胞培养箱爆菌是一个严峻的问题,但只要采取全面清洁与消毒、针对性除菌处理以及强化预防措施等一系列有效方法,就能迅速解决爆菌问题,并预防其再次发生,保障细胞培养工作的顺利进行。

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