6-AF488-Picolyl N3,6-AF488 叠氮己酰胺的常见问题与解决方案!

6-AF488-Picolyl N3,6-AF488 叠氮己酰胺的常见问题与解决方案!
一、物化性质

保存条件:避光、-20°C储存,避免反复冻融

溶解性:易溶于 有机溶剂(DMSO、DMF、甲醇等)

英文名称:6-AF488-Picolyl N3

中文名称:6-AF488 叠氮己酰胺

CAS:1200693-84-0

分子式:C27H26N6O10S2

分子量:658.66

规格:5mg、10mg、25mg

纯度:95%+

二、功能结构与组成

核心组分:

Alexa Fluor 488(AF488) :高性能绿色荧光染料,激发/发射波长约495/519 nm,具有高亮度、良好的光稳定性及低光漂白性。

Picolyl Azide(吡啶甲基叠氮) :含吡啶甲基(Picolyl)与叠氮基团(-N3),吡啶环可增强金属螯合能力,提升点击化学反应效率。

连接臂:通过 己酰胺基团(C6链) 连接荧光基团与叠氮基团,平衡亲水性并维持反应活性。

三、常见问题与解决方案

(一)荧光信号弱或不稳定

可能原因:

jrhz.info

光照淬灭(AF488虽稳定,但长时间强光照射仍会衰减)。

反复冻融导致染料降解。

反应体系含还原剂(如DTT)破坏叠氮基团。

解决方案:

避光操作,成像时控制曝光时间。

分装储存,避免反复冻融(推荐单次用量分装)。

优化反应缓冲液,避免强还原剂(改用TCEP等温和还原剂)。

(二)点击化学反应效率低

可能原因:

催化剂失活(铜(I)易氧化)。

空间位阻(吡啶甲基基团可能干扰偶联)。

解决方案:

使用新鲜配制的Cu(I)催化剂。

延长反应时间(4°C过夜)或提高温度(37°C 1-2小时)。

改用无铜点击化学试剂。

(三)溶解性与溶剂兼容性

溶解问题:

难溶于水,需先用有机溶剂(如DMSO、DMF)助溶,再稀释至缓冲体系。

兼容性风险:

避免与强氧化剂、重金属离子共存(导致叠氮基分解)。

脂质体实验中,需验证与膜组分(如DOPE)的兼容性。

建议步骤:

用无水DMSO配成10 mM母液。

逐步加入PBS(pH 7.4)至目标浓度,避免局部沉淀。

四、关联试剂

PerCP-WGA

Cy7.5 Streptavidin

6-FAM-PEG2-NH2

磺化Cyanine5.5苯硼酸

Cyanine7.5-Streptavidin

IR780 Biotin,IR-780 Biotin

CF488A Tyramide;CF488A 酪胺

Cy7双酸荧光染料;1268616-88-1

Cy7 Bis-COOH;Cyanine7 DiAcid

FAM-PEG2-Amine;476348-62-6

Annexin V Biotin;Annexin V 生物素

Sulfo-Cyanine5.5-Phenylboronic Acid

5-Dodecanoylaminofluorescein;107827-77-0

(本文内容由陕西新研博美生物科技有限公司木南整理)

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