组织蛋白酶 K(Cathepsin K,简称CTSK) 是一种溶酶体半胱氨酸蛋白酶,属于组织蛋白酶家族。它在胶原蛋白和其他骨基质蛋白的降解中起关键作用,尤其在破骨细胞(osteoclasts)介导的骨吸收过程中至关重要。
主要特性与功能
- 底物特异性:
- 高效降解I型胶原蛋白(占骨有机基质的90%以上),也能水解其他骨基质蛋白(如骨桥蛋白、骨连接素)。
- 还可分解弹性蛋白、aggrecan等,参与结缔组织重塑。
表达部位:
- 主要在破骨细胞中高表达,少量表达于软骨细胞、滑膜成纤维细胞、动脉粥样硬化斑块中的巨噬细胞等。
生理作用:
- 骨重塑:破骨细胞分泌组织蛋白酶K至骨吸收区(如皱褶缘),降解胶原蛋白,促进骨吸收。
- 病理作用:与骨质疏松症、关节炎、肿瘤转移(如骨转移)、心血管疾病(动脉钙化)等相关。
临床意义
- 骨质疏松症治疗靶点:
- 抑制组织蛋白酶K可减少骨吸收而不影响骨形成。
- 药物开发:如奥当卡替(Odanacatib)曾进入III期临床试验,但因副作用(中风风险)终止;其他抑制剂(如Balicatib)也在研究中。
其他疾病关联:
- 骨关节炎:软骨降解可能与组织蛋白酶K过度活跃有关。
- 癌症骨转移:促进肿瘤细胞在骨微环境中的侵袭。
- 罕见病:致密性成骨不全症(Pycnodysostosis)由CTSK基因突变导致,表现为骨硬化、骨折易感性增加。
调控机制
- 转录调控:受NF-κB、MITF(小眼畸形相关转录因子)等信号通路影响。
- 抑制剂:内源性抑制剂如胱抑素C(Cystatin C),外源性药物抑制剂(如选择性小分子抑制剂)。
人组织蛋白酶K(Cathepsin K,简称Cath-K)ELISA试剂盒是一款采用酶联免疫吸附测定原理的高灵敏度检测工具,专为精准量化人体样本中组织蛋白酶K含量而设计。
本试剂盒采用双抗体夹心法构建检测体系:预包被于微孔板的高特异性捕获抗体如同精准的"分子捕手",可高效俘获样本中的Cath-K抗原;随后加入的检测抗体则如同携带信号放大器的"侦察兵",通过辣根过氧化物酶(HRP)标记实现信号转换。经过TMB显色液的催化反应,最终产生的吸光度值与目标蛋白浓度呈正相关。
标准化操作流程
1. 试剂平衡:所有组分室温平衡15-30分钟,结晶洗涤液37℃水浴溶解。
2. 加样与孵育:
- 每孔加入100μL标准品或样本,复孔检测;
- 室温孵育1小时,洗涤4次去除未结合物。
3. 显色与终止:TMB底物避光显色30分钟,终止液终止反应后450nm读值。