Tide Quencher 8 CPG「TQ8 CPG」1000A的合成步骤
Tide Quencher 8 CPG(简称TQ8 CPG)是一种预先功能化的控制孔径玻璃(CPG)载体,表面共价接枝有Tide Quencher 8(水溶性近红外暗淬灭剂)结构单元,最大吸收波长约为800 nm,专用于固相寡核苷酸合成中,将淬灭剂整合至寡聚物链的末端。其高效的淬灭性能和稳定的共价结合使得其在FRET探针构建、实时PCR检测及荧光光谱学研究中发挥关键作用。
二、合成步骤概述(600字)
1. 基础材料准备
选择合适孔径(如1000 Å)的CPG载体,该孔径适合寡核苷酸合成,有利于固相反应及高效洗脱。载体表面含有丰富的羟基(–OH),为后续接枝提供反应位点。
2. 表面活化
通过硅烷偶联剂(如3-氨丙基三乙氧基硅烷,APTES)对CPG表面羟基进行改性,引入胺基(–NH₂)官能团。反应一般在无水环境中进行,如于甲苯或其他干燥有机溶剂中,在60–80°C下反应数小时。
3. Tide Quencher 8 羧基活化
使用含有羧基的Tide Quencher 8 分子,通过EDC(1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺)/NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)等活化剂将羧基转化为活性NHS酯。该活化过程在干燥的有机溶剂中进行,通常温和条件下反应1–2小时。
4. 偶联反应
将活化后的TQ8-NHS酯溶液与胺基功能化的CPG载体混合,进行酰胺键形成反应。该步骤在缓冲液或有机溶剂中常温至轻微加温下反应数小时。反应完成后通过过滤和反复洗涤去除未反应残留物。
5. 保护基去除及纯化
如TQ8分子中含有保护基团(例如胺基保护基),通过酸性或碱性条件进行去保护处理,确保淬灭剂结构完整且活性官能团可用于寡核苷酸固相合成。之后,CPG载体进行彻底干燥,准备用于自动合成仪。
6. 质量检测
通过元素分析、FT-IR光谱、紫外-可见吸收光谱检测CPG载体上的TQ8修饰密度及结合效率。确保活性位点均匀,载体具备良好亲水性和淬灭性能。
产品名称:Tide Quencher 8 CPG「TQ8 CPG」1000A
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:齐岳生物
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc