X-Rhodamine MAL,罗丹明荧光骨架的巯基特异性标记试剂
X-Rhodamine MAL 是一种基于罗丹明(Rhodamine)荧光骨架的巯基特异性标记试剂,结构中含有马来酰亚胺(Maleimide)活性基团。其荧光发射峰通常在570-590 nm范围内,发射明亮且光稳定性好,适用于生物大分子(如蛋白质、肽、酶等)中特异性标记含有自由巯基(–SH)的半胱氨酸残基。马来酰亚胺基团与巯基之间通过迈克尔加成反应形成稳定的硫醚键,连接牢固且反应条件温和,无需催化剂,因而被广泛用于荧光标记、生物成像和生物传感器制备。
纯化过程
合成与粗产物处理
X-Rhodamine MAL通常通过罗丹明衍生物的化学修饰合成,合成完成后反应液中含有未反应的起始物、副产物及溶剂杂质。初步粗提常采用旋转蒸发去除大部分挥发性有机溶剂。
柱层析纯化
为了获得高纯度的X-Rhodamine MAL,常使用硅胶柱层析进行分离纯化。利用其亲水性和疏水性差异,选用适当比例的有机溶剂(如乙酸乙酯/正己烷或甲醇/氯仿混合体系)梯度洗脱,分离出目标产物。荧光染料的特性使得纯化过程中可通过紫外光或荧光检测柱色层带,方便准确回收。
高效液相色谱(HPLC)精制
为达到高纯度要求,尤其是用于生物医学研究,进一步采用反相高效液相色谱纯化。采用C18反相柱,梯度洗脱方式,监测波长通常选在550-580 nm。此步骤可以去除结构相似的杂质和未反应的马来酰亚胺衍生物,确保产品的化学纯度和批次一致性。
干燥与储存
纯化后的X-Rhodamine MAL通过冷冻干燥或减压干燥获得粉末状固体,防止光照和湿气引起的降解。通常分装于避光密封瓶中,置于-20°C低温干燥保存,以延长稳定性。
表征方法
质谱分析(MS)
通过质谱检测确认分子量是否符合理论值。电喷雾电离质谱(ESI-MS)常用于检测分子离子峰,确保目标分子正确合成,无明显杂质。
核磁共振(NMR)
^1H NMR和^13C NMR分析确认分子骨架结构和马来酰亚胺基团的成功引入。关键特征信号如马来酰亚胺双键的特征峰和罗丹明结构的芳香峰应清晰可见。
紫外-可见光谱(UV-Vis)
测定X-Rhodamine MAL的吸收光谱,典型的罗丹明染料峰位于约550 nm,表明分子光学性能正常。
荧光光谱
激发波长约在540-560 nm,发射峰在570-590 nm,荧光强度和光稳定性检测有助于评价染料性能。
高效液相色谱(HPLC)
纯度检测,保证产品达到95%以上纯度,适合生物标记应用。
产品名称:X-Rhodamine MAL
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:齐岳生物
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc