TRITC Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽的合成及纯化过程(tritraining)

TRITC Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽的合成及纯化过程(tritraining)

TRITC Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽的合成及纯化过程

TRITC-Phalloidin 是将荧光染料 TRITC(四甲基罗丹明异硫氰酸酯)共价标记在鬼笔环肽(Phalloidin)分子上的荧光探针。Phalloidin 是从毒蘑菇 Amanita phalloides 中分离出的环状七肽,具有高度亲和性地结合肌动蛋白纤维(F-actin),并阻止其解聚。而 TRITC 是一种发射橙红色荧光的罗丹明染料,激发波长约为 540–550 nm,发射波长为 570–580 nm,具有良好的光稳定性和荧光亮度。

将 TRITC 与 Phalloidin 结合后,所得 TRITC-Phalloidin 既保留了 Phalloidin 对 F-actin 的强亲和结合能力,也具备 TRITC 良好的荧光信号特性,使其成为细胞骨架研究中用于标记和检测肌动蛋白丝的经典工具。

二、合成过程概述

Phalloidin 的活化处理

Phalloidin 分子上含有一个或多个氨基(–NH₂)或羟基(–OH)基团,可作为与荧光染料结合的反应位点。通常选择在中性至碱性缓冲液(如PBS或碳酸盐缓冲液,pH 8.0–9.0)中激活这些基团,以增强反应效率。

TRITC 的反应准备

TRITC 是一种具有异硫氰酸酯(–N=C=S)基团的染料,能够在温和条件下与氨基发生共价结合,形成稳定的硫脲结构(–NH–CS–NH–)。TRITC 通常预溶于无水 DMSO 或 DMF 中,以防止其在水溶液中水解失活。

共价偶联反应

将溶解好的 TRITC 缓慢滴加至含有 Phalloidin 的缓冲液中,反应在黑暗条件下搅拌 6–24 小时,温度控制在 4–25°C,以防止光降解和副反应发生。为了防止交联或非特异性结合,控制反应摩尔比(通常为 TRITC:Phalloidin = 1.2:1 左右)。

终止反应与中和

反应结束后加入适量的胺类缓冲液(如甘氨酸)封闭未反应的异硫氰酸酯基团,防止进一步非特异性结合。

产品名称:TRITC Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

厂家:齐岳生物

推荐产品:

cas:148408-89-3

DOTAM

DOTA衍生物

cas:147597-66-8

p-SCN-Bn-NOTA

CAS:1407166-70-4

仅用于科研,不能用于人体。小编axc

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