德泰生物cDNA第一链合成试剂盒是一款高效、稳定的反转录工具，适用于Total RNA或Poly(A)+RNA为模板合成cDNA第一链。本试剂盒含有cDNA第一链合成所需的全部试剂。试剂盒中附带的Oligo dT Primer对于Poly A+ mRNA的锚定能力更强，逆转录效率更高。DTR Transcriptase是对是一种改良的新型反转录酶，其可以很好地抑制RNA高级结构与反转录酶的非特异性结合。产物可广泛应用于cDNA第二链合成、PCR法扩增等，尤其适用于全长cDNA合成等。
产品优势- 灵敏：起始模板低至总RNA 10pg/mRNA 1pg；
- 高效：优化Oligo dT Primer对于Poly A+mRNA的锚定能力更强，逆转录效率更高；
- 高保真：改良DTR Transcriptase抑制酶与RNA非特异性结合。
- 总RNA或者mRNA样本（总RNA 10pg-500ng/mRNA 1pg-100ng）；
- 振荡器、瞬时离心机、PCR仪等。
1 RNA 模板变性
在 RNase-free 管中配制下表反应液：
轻轻涡旋混匀，瞬时离心。65℃保温 5 min 后，迅速冰上冷却至少 3Min。
注：1、此步骤可以使RNA 变性从而打开二级结构，提高反转录效率；
2、一般情况下首选 Oligo dT Primer，其与 mRNA 的 3’ Poly A 尾配对，可获得最高产量的全长 cDNA。基因特异性引物(GSP)和 Random hexamers 引物视具体情况而定。
2. 配制 cDNA 第一链合成反应液：
轻轻涡旋混匀，瞬时离心。
按照下列条件进行逆转录反应：
a. 仅当使用 Random hexamers 时需要此步骤；仅使用 Oligo dT Primer 或GSP 引物时省略此步骤。
产物可立即用于 PCR 反应，或在-20℃保存；
长期存放建议分装后在-80℃保存。
cDNA 应避免反复冻融。
