基础知识概述:
核心结构:基于罗丹明荧光团,含氧杂蒽骨架,具有磺酸基团增强水溶性,以及乙基铵离子修饰的氮原子。
活性基团:NHS酯基(琥珀酰亚胺酯),位于分子末端,可与伯胺形成酰胺键(-CONH-)。
光谱特性:
激发/发射波长:激发波长:577 nm,发射波长:600 nm,属橙红色光谱区。
荧光性能:高荧光量子产率、良好的热稳定性和光稳定性,pH 2-11范围内荧光性能稳定。
中文名:ATTO Rho12琥珀酰亚胺酯
英文名:ATTO Rho12 NHS Ester
分子量(g/mol):847
激发波长:577 nm
发射波长:600 nm
规格标准:1mg、5mg、10mg
试剂厂家:陕西新研博美生物科技有限公司
包装:
相关应用:
生物标记:
用于标记含氨基的分子,如蛋白质、肽和氨基修饰的寡核苷酸。
适用于流式细胞术(FACS)、荧光原位杂交(FISH)和其他生物学应用。
荧光成像:
适用于荧光显微镜成像,尤其在红色光谱区表现出色。
使用方法:
1.储备液配制:
溶剂:无水DMSO(避免水解),建议浓度10 mM。
保存:分装后-20°C避光储存,避免反复冻融。
2.标记反应:
缓冲体系:pH 8.0–9.0的碳酸盐缓冲液或PBS。
摩尔比例:初始比例染料:蛋白质 = 10:1,优化范围5:1至20:1。
反应条件:室温(20–25°C)避光振荡30–60分钟。
3.纯化步骤:
方法:凝胶过滤层析(如Sephadex G-25柱,PBS洗脱)或超滤离心(如Amicon Ultra离心管,3–10 kDa截留分子量)。
目的:去除游离染料,确保偶联物纯度,避免背景干扰。
注意事项:
纯度标准95%+
保存建议:避免反复冻融,避光保存,储液应该立即使用,任何未用的溶液分装小份冷冻于 < -20°C
注意事项:仅用于科学研究
相关试剂(部分):
CY3-YNE
FM-red
Cy5-PEG3-endo-BCN
Dansylamide
Vari Fluor 405 SE
ATTO Rho6G NHS Ester
ATTO Rho11 NHS Ester
ATTO Rho12 NHS Ester
ATTO Rho101 NHS Ester
ATTO 550 NHS Ester
ATTO 590 NHS Ester
ATTO 594 NHS Ester
ATTO 610 NHS Ester
ATTO 620 NHS Ester
ATTO 633 NHS Ester
ATTO 647N NHS Ester
ATTO 680 NHS Ester
ATTO 700 NHS Ester
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