基础知识概述:
发射波长:808 nm,属于近红外荧光染料
核心组分特性:
IR-808染料:具有良好的组织穿透性,可减少生物组织自发荧光干扰。
生物素:对亲和素(avidin)和链霉亲和素(streptavidin)具有很强的亲和力。
基本参数:
中文名:IR808-生物素
英文名:IR808-biotin,IR808-C6-biotin
规格标准:1mg、5mg、10mg
试剂厂家:陕西新研博美生物科技有限公司
包装:
相关应用:
深层组织成像:适用于活体动物成像,可穿透深层组织并生成高信噪比图像。
靶向识别:生物素部分可特异性结合细胞表面过表达的生物素受体,或与预标记的亲和素/链霉亲和素结合,实现定位。
分子检测:通过外源激光激发产生荧光信号,实现生物分子的定量与定位分析。
实验操作流程:
1.生物分子标记(以抗体/蛋白为例)
活化生物素结合位点:
将目标蛋白(如抗体)溶于pH 7.4缓冲液,加入NHS-PEG4-Biotin等交联剂(摩尔比1:5-1:20),室温反应1-2小时。
偶联荧光染料:
将IR808-Biotin加入上述体系(染料:蛋白摩尔比2:1),避光搅拌2小时。
纯化:
使用离心过滤器(100 kDa截留分子量)或凝胶色谱纯化,去除游离染料。
2. 亲和素系统应用(如免疫检测)
样本预处理:
组织切片/细胞固定后,用含1% BSA的PBS封闭非特异性位点。
探针孵育:
加入生物素化一抗(如IR808-Biotin标记抗体),37℃孵育1小时。
信号放大:
加入链霉亲和素-HRP(或荧光二抗),避光孵育30分钟。
显影/成像:
若用HRP系统:加DAB显色;
若用荧光系统:直接进行NIR成像(激发/发射波长808 nm)。
3. 纳米颗粒标记
优先选择:
IR808-C6-Biotin优先,其C6间隔臂可减少空间位阻,提高标记效率。
操作流程:
纳米颗粒(如金颗粒、量子点)表面修饰氨基(如用APTES)。
加入IR808-C6-Biotin(通过NHS酯反应偶联),离心纯化。
注意事项:
纯度标准95%+
保存建议:避免反复冻融,避光保存,储液应该立即使用,任何未用的溶液分装小份冷冻于 < -20°C
注意事项:仅用于科学研究
相关试剂(部分):
BODIPY FL alkyne
CY5-YNE
Cy 5 hydrazide
Biotin-TAT
7-Ethoxy-4-trifluoromethylcoumarin
(±)-ANAP hydrochloride
Rhodamine 101 chloride
Hoechst 33342 analog
Cy5-PEG3-azide
Calcein Blue AM
2,6-Diiodo-BODIPY 493/503
IR-797 chloride
Cyanine5.5 tetrazine
Cysteine thiol probe
BODIPY-X-Alkyne
4',5'-Dibromofluorescein
CY5-Dextran
Cy3 maleimide chloride
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