荧光定量PCR概念
荧光定量PCR(Real-Time Quantitative PCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时检测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
SYBR Green I 荧光染料原理
在PCR反应体系中加入过量的SYBR荧光染料,SYBR特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完成同步。
荧光定量PCR如何工作?
在扩增过程中,荧光信号随着PCR产物的增加而增加
---在PCR反应体系中加入荧光基团
---荧光基团在激光的作用下,产生波长更长的发射光
---利用荧光信号的变化动态检测整个反应过程
荧光定量PCR应用