英文名称:IRDye 800 NHS
中文名称:IR800 NHS活性脂
MF:C50H58N3NaO17S4
MW:1124.25
CAS:956579-01-4
化学结构与性质
IR-800CW NHS酯是一种基于磺基苝并三嗪类结构的近红外荧光染料,具有极高的光稳定性和生物相容性。NHS酯基团使其能够在温和条件下与生物分子中游离的氨基(主要是赖氨酸残基)共价结合,形成稳定的酰胺键,实现高效的生物大分子标记。
NIR荧光性质:激发和发射波长位于近红外波段,穿透能力强,适合体内成像和深组织检测。
亲水性设计:多磺酸基团增加了染料的水溶性和稳定性,减少非特异性结合。
高光稳定性:适合长时间成像和动态监测。
活性酯结构:通过NHS酯实现高效、选择性和快速的生物偶联反应。
反应机制与使用方法
IR-800CW NHS酯通过其活性NHS酯基团在pH 7.5–8.5条件下,与生物大分子(蛋白、抗体、肽、核酸等)中游离的氨基发生亲核取代,形成共价的酰胺键,实现稳定的荧光标记。
使用步骤概览:
溶解:采用无水DMSO或DMF配制浓缩储备液(1–10 mM);
反应环境:在pH 7.5–8.5缓冲液(如碳酸盐缓冲液)中进行标记反应;
反应时间:一般室温反应30分钟至2小时;
终止与纯化:反应结束后加入甘氨酸等游离胺终止反应,通过透析或色谱去除游离染料,获得纯净标记产品。
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