科研试剂EvaGreen (20× in Water)的应用领域和作用机制(科研试剂是否按医疗器械管理)

科研试剂EvaGreen (20× in Water)的应用领域和作用机制(科研试剂是否按医疗器械管理)

标题:EvaGreen (20× in Water)

【参数信息】

英文名称:EvaGreen (20× in Water)

激发波长:500 nm

发射波长:530 nm

纯度:≥95%

储存条件:-20℃避光干燥

生产厂商:西安强化生物科技

【简单概述】

EvaGreen 是新一代双链DNA(dsDNA)结合染料,可实时定量PCR(qPCR)、高分辨率熔解曲线(HRM)分析及数字PCR(ddPCR)等分子生物学应用。

其 "20×水溶液" 指浓缩储存液,使用时需稀释至工作浓度(通常为1×)。

化学本质:绿色荧光核酸染料,激发波长≈500 nm,发射波长≈530 nm(结合DNA时)。

结构特点:由两个单体染料分子通过柔性间隔臂连接成二聚体,形成的"按需释放"(release-on-demand)构象。

作用机制

1. "按需释放"动态结合模型

EvaGreen的作用机制基于其构象转换:

无DNA时:染料分子呈闭合环状构象,无DNA结合活性,荧光背景极低。

有DNA时:构象转为开放线性状态,嵌入dsDNA小沟,荧光强度增强。

动态平衡:PCR扩增过程中,新生成的dsDNA持续触发染料构象转换,实现活性染料的按需供应。

2. 抑制PCR抑制效应的原理

饱和浓度使用:因构象转换机制,EvaGreen可在高浓度下使用,提供强信号的同时不抑制Taq酶活性。

避免染料重分布 :高浓度下染料不易从小扩增子迁移至大扩增子,确保多重PCR中多个扩增子的溶解峰清晰可辨。

【应用领域】

(一)实时定量PCR(qPCR)

高灵敏度检测低丰度靶标,适用于基因表达分析。

兼容快速PCR程序(缩短延伸时间)。

(二)高分辨率熔解曲线(HRM)分析

饱和染料浓度下可区分 单碱基突变(SNP) 、甲基化差异。

试剂盒案例:TIANGEN HRM Kit直接集成EvaGreen,简化操作并提升信噪比。

(三) 数字PCR(ddPCR)

行业标准染料:唯一经验证适用于液滴数字PCR的DNA结合染料。

直接定量线粒体DNA,无需核基因参照,减少误差。

(四)其他分子检测技术

等温扩增:实时监测扩增进程。

细胞活力检测:选择性标记死细胞。

【相关试剂】

SMPEG2

AF488 四嗪

BXQ-1 炔烃

FMOC-抑胃酶氨酸

HumanDiO-Ac-LDL

荧光染料Forte Blue DHPE

Cell Meter FITC-Annexin V

Cell Meter 细胞自噬检测试剂盒

Alexa Fluor 594-Streptavidin

Indo-1,AM,Cell Permeant 钙离子荧光探针

Fluo-8 Potassium Salt, Cell lmpermeant

Indo-1 Pentapotassium Salt, Cell lmpermeant

以上资料由西安强化生物科技有限公司xxn整理!

本试剂仅适用于科研实验,敬请知悉。

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