一、物化性质
保存条件：避光、-20°C储存，避免反复冻融
溶解性：溶于水以及部分有机溶液。
中文名称：YOYO-3（1mM的DMSO溶液）
英文名称：YOYO-3(1mM solution in DMSO)
CAS号：156312-20-8
分子式：C53H62I4N6O2
分子量：1322.73
激发波长(Ex)：612 nm
发射波长(Em)：631 nm
规格：5mg，10mg，25mg
纯度：95%+
二、功能特性与组成
（一）结构核心：由两个碘化苯并噁唑环通过柔性链连接，形成对称的二聚体结构，带有4个正电荷，增强与DNA的亲和力（亲和力提高约100倍）。
（二）荧光特性
激发/发射波长：与核酸结合后，激发波长（Ex）为612 nm，发射波长（Em）为631 nm（远红光范围）。
荧光增强机制：游离状态下几乎无荧光，与核酸（DNA/RNA）结合后荧光强度增强100-1000倍。
量子产率：0.15（与DNA结合时）。
消光系数：167,000 cm⁻¹M⁻¹（与DNA结合时）。
（三）生物功能
细胞渗透性：非细胞膜渗透性，仅能标记死细胞或固定细胞的核酸，是理想的死细胞指示剂和核复染剂。
应用场景：核酸标记、多色荧光成像（避免与FITC/罗丹明光谱重叠）、流式细胞术检测死细胞。
三、使用方法
（一）工作液配制
稀释方法：
取1 mM原液，用PBS或HHBS缓冲液稀释至 工作浓度。
例：2 μM工作液 = 1 μL原液 + 500 μL PBS。
首次实验建议测试多个浓度，以优化染色效果并避免非特异性结合。
注意事项：
原液需避光保存于 ≤ -20°C，使用前室温解冻并低速离心，避免反复冻融（分装储存）。
稀释后工作液建议立即使用。
（二）染色步骤
细胞处理：
吸出细胞培养基，若为活细胞需先固定。
染色孵育：
加入YOYO-3工作液，避光孵育 15–60分钟。
洗涤与检测：
吸除染色液，用缓冲液洗涤。
检测方式：
荧光显微镜：使用Cy5滤光片组观察。
流式细胞仪：633 nm激发，660/20 nm接收通道。
四、关联试剂
Acid-PEG25-NHS Ester
Biotin-C1-PEG3-C1-NH2
TCO-C3-PEG3-C3-amine
pH荧光探针BCECF，酸
pH荧光探针BCECF， AM
TMA-DPH(疏水膜荧光探针)
Alexa Fluor 647 Concanavalin A
Alexa Fluor 647 C2 Maleimide
AF647 NHS ester，AlexaFluor 647 NHS
AF 647 Acid，Alexa Fluor 647 COOH
（本文内容由陕西新研博美生物科技有限公司木南整理）
