CAS号:156312-20-8,YOYO-3的工作液配制和染色步骤

CAS号:156312-20-8,YOYO-3的工作液配制和染色步骤

一、物化性质

保存条件:避光、-20°C储存,避免反复冻融

溶解性:溶于水以及部分有机溶液。

中文名称:YOYO-3(1mM的DMSO溶液)

英文名称:YOYO-3(1mM solution in DMSO)

CAS号:156312-20-8

分子式:C53H62I4N6O2

分子量:1322.73

激发波长(Ex):612 nm

发射波长(Em):631 nm

规格:5mg,10mg,25mg

纯度:95%+

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二、功能特性与组成

(一)结构核心:由两个碘化苯并噁唑环通过柔性链连接,形成对称的二聚体结构,带有4个正电荷,增强与DNA🧬的亲和力(亲和力提高约100倍)。

(二)荧光特性

激发/发射波长:与核酸结合后,激发波长(Ex)为612 nm,发射波长(Em)为631 nm(远红光范围)。

荧光增强机制:游离状态下几乎无荧光,与核酸(DNA🧬/RNA)结合后荧光强度增强100-1000倍。

量子产率:0.15(与DNA🧬结合时)。

消光系数:167,000 cm⁻¹M⁻¹(与DNA🧬结合时)。

(三)生物功能

细胞渗透性:非细胞膜渗透性,仅能标记死细胞或固定细胞的核酸,是理想的死细胞指示剂和核复染剂。

应用场景:核酸标记、多色荧光成像(避免与FITC/罗丹明光谱重叠)、流式细胞术检测死细胞。

三、使用方法

(一)工作液配制

稀释方法:

取1 mM原液,用PBS或HHBS缓冲液稀释至 工作浓度。

例:2 μM工作液 = 1 μL原液 + 500 μL PBS。

首次实验建议测试多个浓度,以优化染色效果并避免非特异性结合。

注意事项:

原液需避光保存于 ≤ -20°C,使用前室温解冻并低速离心,避免反复冻融(分装储存)。

稀释后工作液建议立即使用。

(二)染色步骤

细胞处理:

吸出细胞培养基,若为活细胞需先固定。

染色孵育:

加入YOYO-3工作液,避光孵育 15–60分钟。

洗涤与检测:

吸除染色液,用缓冲液洗涤。

检测方式:

荧光显微镜🔬:使用Cy5滤光片组观察。

流式细胞仪:633 nm激发,660/20 nm接收通道。

四、关联试剂

Acid-PEG25-NHS Ester

Biotin-C1-PEG3-C1-NH2

TCO-C3-PEG3-C3-amine

pH荧光探针BCECF,酸

pH荧光探针BCECF, AM

TMA-DPH(疏水膜荧光探针)

Alexa Fluor 647 Concanavalin A

Alexa Fluor 647 C2 Maleimide

AF647 NHS ester,AlexaFluor 647 NHS

AF 647 Acid,Alexa Fluor 647 COOH

(本文内容由陕西新研博美生物科技有限公司木南整理)

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