Cyanine3 (OH)₂ 是属于氰染料（Cyanine dyes）家族的荧光染料，亦称为花青素Cy3-(OH)₂。Cyanine染料以其优异的光学性能和结构可调性，广泛应用于生命科学中的荧光标记、分子探针和活体成像等领域。Cyanine3是氰染料中具有中等共轭长度的品种，拥有明亮的橙红色荧光，激发和发射光谱适合多种生物成像仪器。其(OH)₂衍生物则带有两个羟基基团，显著提升了染料的水溶性和生物相容性，方便进一步化学修饰和偶联。
分子结构与性质
Cyanine3 (OH)₂的分子结构由两个吡咯或吡啶类杂环，通过三至五个亚甲基桥链连接构成，形成延伸的共轭体系。该共轭体系决定了其独特的光吸收和发射特性。Cyanine3的激发峰通常位于约550 nm左右，发射峰在570 nm附近，属于橙红色荧光波段。
分子中含有的两个羟基（–OH）通常位于染料的末端侧链，使染料在水溶液中具有良好的溶解度，减少了团聚和自淬灭现象，提升了荧光的亮度和稳定性。同时，羟基提供了便捷的化学反应位点，方便与蛋白质、核酸、聚合物等生物大分子通过酯化或醚化等共价键连接。
化学修饰潜力
羟基基团为Cyanine3 (OH)₂的化学改造提供了多种可能：
酯化和醚化反应：羟基可与含活性酯、酸酐、异氰酸酯等试剂反应，实现与生物大分子（蛋白质、核酸、多糖）或其他载体的稳定偶联。
聚合物接枝：可通过羟基引入聚乙二醇（PEG）等亲水聚合物，增强染料的水溶性、生物相容性及循环稳定性。
交联反应：羟基能够参与构建交联结构，提高染料与目标分子的结合力。
多功能探针设计：利用羟基作为起点可设计多功能荧光探针，实现靶向、生物响应或环境敏感型成像。
主要应用领域
分子标记与生物成像
Cyanine3 (OH)₂广泛用于核酸、蛋白质等生物分子的荧光标记，通过与抗体、寡核苷酸探针偶联，实现免疫荧光、荧光原位杂交（FISH）、流式细胞术等多种应用。其橙红色荧光信号清晰，背景低，适合细胞内和组织切片成像。
多色荧光共聚焦显微镜
因激发发射波段适中，Cyanine3 (OH)₂与其他荧光染料（如FITC、Cy5等）可实现多重染色，帮助研究复杂生物过程和细胞信号网络。
荧光传感器
通过化学修饰，Cyanine3 (OH)₂可用作pH、离子浓度、酶活性等环境敏感型荧光探针，广泛用于活细胞动态监测。
体外诊断与免疫分析
利用其高灵敏度，Cyanine3 (OH)₂在ELISA、Western blot、免疫组化中提高检测灵敏度和信噪比。
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