一、试剂介绍
ATTO 465 NHS ester是一种基于罗丹明 (Rhodamine) 结构的新型荧光标记物。具有强吸收、高荧光量子产率、高热稳定性和光化学稳定性,适合单分子检测和高分辨率显微镜。ATTO 465 NHS ester是 ATTO465的NHS酯类衍生物,可标记蛋白或抗体。
(1)应用领域
1、细胞成像:
标记抗体、链霉亲和素或纳米颗粒,用于共聚焦显微镜或超分辨成像(STED/PALM)。
2、流式细胞术:
多色分析中的绿色通道标记(如与APC、PE-Cy7联用)。
3、核酸标记:
通过氨基修饰的寡核苷酸进行荧光探针制备。
(2)实验操作指南
蛋白标记步骤(以IgG为例):
1、溶解染料: 将ATTO 465 NHS酯溶于无水DMSO(建议浓度10 mM)。
2、反应:
将蛋白(如抗体)溶于PBS或碳酸盐缓冲液(pH 8.5)。
按摩尔比(染料:蛋白 = 5:1至20:1)加入染料溶液,室温避光反应1小时。
3、纯化:
使用脱盐柱(如PD-10)或透析去除游离染料。
二、试剂属性
中文名称:AT 465 NHS;ATTO 465 活性酯;ATTO 465 琥珀酰亚胺酯
英文名称:ATTO 465 NHS ester;ATTO 465 Succinimidyl Ester;AT 465 SE
CAS号:1173020-88-6
分子式:C21H21ClN4O8
分子量:492.87
纯度:≥95%
外观:固体、液体
品牌:陕西新研博美生物科技有限公司
溶解性:常溶于水或极性有机溶剂
储存条件:-20°C 干燥避光保存,避免反复冻融
规格:5mg,10mg,25mg
结构式:
三、相关试剂
Cyanine5 Boc-hydrazide chloride,Cy5 Boc-HZ chloride
Cy5.5 acetate,花青素Cy5.5 acetate
Sulfo-CY5-阿仑膦酸,Sulfo Cyanine5-Alendronate
Cy5-Rosmarinic acid,花青染料Cy5标记的迷迭香酸
Cy7 LEL;Cyanine7 Tomato lectin;花菁染料CY7标记的番茄凝集素
Cy5.5 LEL;Cyanine5.5 Tomato lectin;花菁染料CY5.5标记的番茄凝集素
Cy5 LEL;Cyanine5 Tomato lectin;花菁染料CY5标记的番茄凝集素
Cy3 LEL;Cyanine3 Tomato lectin;花菁染料CY3标记的番茄凝集素
IR820-NHS;IR820 SE
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该试剂只用于科研实验,不能用于人体。