【科研人必看!】科研试剂Fitc-FAPI-4的功能结构与组成(科研人什么意思)

【科研人必看!】科研试剂Fitc-FAPI-4的功能结构与组成(科研人什么意思)

一、物化性质

保存条件:避光、-20°C储存,避免反复冻融

溶解性:溶于水以及部分有机溶液。

英文名称: Fitc-FAPI-4

中文名称:荧光素异硫氰酸酯-FAPI-4

规格:5mg,10mg,25mg

纯度:95%+

二、功能结构与组成

FITC(异硫氰酸荧光素)

结构:FITC具有三环芳香结构,包含一个荧光发色团,其激发波长约为495 nm,发射波长为520-530 nm,发出明亮的绿色荧光。

偶联方式:通过异硫氰酸酯基团与生物分子的氨基或巯基形成共价键,实现稳定连接。

FAPI-4

结构:基于喹啉衍生物的FAP抑制剂,具有高选择性结合FAP的能力。

功能:作为FAP的特异性抑制剂,可靶向『肿瘤』微环境中的成纤维细胞活化蛋白(FAP),后者在多种癌症中过度表达。

偶联物结构

Fitc-FAPI-4通过化学偶联将FITC的荧光基团与FAPI-4的FAP结合位点连接,形成兼具靶向性与可视化能力的探针。

其结构设计确保FAPI-4的FAP识别能力与FITC的荧光特性协同作用。

三、常见问题和解决方案

(一)偶联效率低

可能原因

试剂配制错误(如B液盐浓度或pH不对)。

偶联时间不足或预活化填料不合适。

抗体浓度不足或未充分预处理。

解决方案

检查并调整B液配制(如盐浓度、pH值)。

延长偶联时间或尝试其他预活化填料。

确保抗体浓度≥2 mg/mL,并进行预处理(如去除NaN₃)。

(二)非特异性吸附

可能原因

微球表面未封闭或封闭时间不足。

蛋白质聚集导致非特异性结合。

解决方案

使用封闭剂(如BSA、甘氨酸)并延长封闭时间。

降低乙醇胺用量并减少蛋白包被量。

及时清洗介质并避免样品失活。

(三)偶联比例(Dar)不均

可能原因

随机偶联导致Dar值波动。

抗体与FITC的结合比例不一致。

解决方案

采用位点特异性偶联方法。

通过多平行反应筛选合适偶联比例。

四、关联试剂

ICG-Maleimide

ICG-Sulfo-OSu

SiR-NHS Ester

DiR'[DiIC18(7)]

DiO(绿色荧光探针)

Dil(橙色荧光探针)

Did(红色荧光探针

ATTO 425 maleimide

3,3'-二己氧基羰花青碘化物

3,3-二丙基氧杂羰花青碘化物

Me-tetrazine-Disulfo-ICG

3,3’-二戊基氧杂羰花青碘化物

ATTO 594 Succinimidyl Ester

(本文内容由陕西新研博美生物科技有限公司木南整理)

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