一、物化性质
保存条件:避光、-20°C储存,避免反复冻融
溶解性:溶于水以及部分有机溶液。
英文名称: Fitc-FAPI-4
中文名称:荧光素异硫氰酸酯-FAPI-4
规格:5mg,10mg,25mg
纯度:95%+
二、功能结构与组成
FITC(异硫氰酸荧光素)
结构:FITC具有三环芳香结构,包含一个荧光发色团,其激发波长约为495 nm,发射波长为520-530 nm,发出明亮的绿色荧光。
偶联方式:通过异硫氰酸酯基团与生物分子的氨基或巯基形成共价键,实现稳定连接。
FAPI-4
结构:基于喹啉衍生物的FAP抑制剂,具有高选择性结合FAP的能力。
功能:作为FAP的特异性抑制剂,可靶向肿瘤微环境中的成纤维细胞活化蛋白(FAP),后者在多种癌症中过度表达。
偶联物结构
Fitc-FAPI-4通过化学偶联将FITC的荧光基团与FAPI-4的FAP结合位点连接,形成兼具靶向性与可视化能力的探针。
其结构设计确保FAPI-4的FAP识别能力与FITC的荧光特性协同作用。
三、常见问题和解决方案
(一)偶联效率低
可能原因
试剂配制错误(如B液盐浓度或pH不对)。
偶联时间不足或预活化填料不合适。
抗体浓度不足或未充分预处理。
解决方案
检查并调整B液配制(如盐浓度、pH值)。
延长偶联时间或尝试其他预活化填料。
确保抗体浓度≥2 mg/mL,并进行预处理(如去除NaN₃)。
(二)非特异性吸附
可能原因
微球表面未封闭或封闭时间不足。
蛋白质聚集导致非特异性结合。
解决方案
使用封闭剂(如BSA、甘氨酸)并延长封闭时间。
降低乙醇胺用量并减少蛋白包被量。
及时清洗介质并避免样品失活。
(三)偶联比例(Dar)不均
可能原因
随机偶联导致Dar值波动。
抗体与FITC的结合比例不一致。
解决方案
采用位点特异性偶联方法。
通过多平行反应筛选合适偶联比例。
四、关联试剂
ICG-Maleimide
ICG-Sulfo-OSu
SiR-NHS Ester
DiR'[DiIC18(7)]
DiO(绿色荧光探针)
Dil(橙色荧光探针)
Did(红色荧光探针
ATTO 425 maleimide
3,3'-二己氧基羰花青碘化物
3,3-二丙基氧杂羰花青碘化物
Me-tetrazine-Disulfo-ICG
3,3’-二戊基氧杂羰花青碘化物
ATTO 594 Succinimidyl Ester
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