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Sulfo-Cy5-Glutamine，磺化-Cy5-谷氨酰胺的反应步骤

Sulfo-Cy5-Glutamine是一种将磺化Cyanine5（Sulfo-Cy5）荧光染料与谷氨酰胺分子共价连接形成的荧光探针，广泛应用于分子标记和成像研究。该探针结合了Sulfo-Cy5的优异光学性能与谷氨酰胺的生物功能特性，通过化学合成实现两者的有效连接，赋予分子良好的水溶性、稳定性及特异性识别能力。以下为Sulfo-Cy5-Glutamine的典型合成反应步骤描述。

首先，制备Sulfo-Cy5活性酯衍生物是合成的关键。通常以Sulfo-Cy5羧基为起始物，采用N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）和1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐（EDC·HCl）作为活化剂，在有机溶剂如二甲基甲酰胺（DMF）中反应，生成Sulfo-Cy5-NHS酯。该活性酯化合物具有较高的反应活性，适合与含有氨基的分子进行高效偶联。

随后，将谷氨酰胺溶解于适宜的缓冲液（如PBS，pH约7.4）中，确保其氨基处于游离且活泼的状态。将Sulfo-Cy5-NHS酯缓慢滴加到谷氨酰胺溶液中，反应通常在室温下进行，搅拌保持均匀。此过程通过酰胺键形成实现荧光染料与谷氨酰胺的共价连接。反应时间一般为数小时，以确保充分反应且减少副产物。

在反应过程中，控制pH值对反应效率至关重要。偏碱性环境（pH 7.4-8.0）有利于氨基的亲核攻击活性酯，从而促进偶联反应；但过高pH可能导致NHS酯的水解，降低产率。因此需精确调节体系条件，兼顾反应速率和稳定性。

反应结束后，混合物通过透析、凝胶渗透色谱（GPC）或高效液相色谱（HPLC）等方法进行纯化，去除未反应的Sulfo-Cy5-NHS酯、游离谷氨酰胺和其他杂质。纯化后的Sulfo-Cy5-Glutamine探针以稳定的形式存在，具备良好的水溶性和优异的荧光性能。

最终产物的结构与纯度通过质谱（MS）、核磁共振（NMR）和紫外-可见光光谱（UV-Vis）等技术进行鉴定，确认荧光染料成功偶联谷氨酰胺，且未发生明显的副反应或分解。

总体来看，Sulfo-Cy5-Glutamine的合成以Sulfo-Cy5羧基活化为起点，通过NHS酯偶联技术实现与谷氨酰胺氨基的共价结合。温和的反应条件、合理的pH调控及高效的纯化流程确保了产物的质量和功能性，为其在荧光标记及分子探针研究中提供了可靠的物质基础。

产品名称：Sulfo-Cy5-Glutamine，磺化-Cy5-谷氨酰胺

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研