名称:6-Carboxyrhodamine 110 NHS Ester
包装: 瓶装
供应: 西安晖瑞生物
适用范围:仅限科研实验使用
规格选择: 多种规格,包含50 mg、100 mg、250 mg、500 mg等
6-Carboxyrhodamine 110 NHS Ester 是一种绿色荧光染料的活性酯衍生物,广泛用于共价标记含一级胺的生物分子,如肽、蛋白质、核酸等。其核心结构为 rhodamine 类荧光团,具有较高的量子产率和光稳定性,而 NHS 酯(N-hydroxysuccinimide ester)基团则赋予其良好的偶联活性,便于与生物分子形成稳定的酰胺键。
该染料主要应用于荧光标记、显微成像、流式细胞术、FRET 实验及各种荧光探针的开发中,尤其适合对绿色通道敏感的检测系统。
分子结构与光谱特性
6-Carboxyrhodamine 110 属于 xanthene 类荧光染料,其 6-位上的羧基通过活化形成 NHS 酯,可与靶分子上的胺基发生反应,形成共价键。相比其他 rhodamine 染料,Rhodamine 110 显示出更蓝移的激发/发射波长,使其适合在 FITC 通道下检测。
其光谱特性如下:
- 激发波长(Excitation):约 496–502 nm
- 发射波长(Emission):约 520–530 nm
- 荧光颜色:鲜绿色
- 荧光量子产率高,信噪比清晰,适合荧光成像
- 荧光在中性和弱碱性条件下稳定,适合大多数生物体系
活性酯偶联原理
NHS 酯结构是一种常见的胺反应试剂,能与生物分子中的伯胺(如赖氨酸残基)发生酰胺化反应。这种反应温和、专一,通常在 pH 7.5–8.5 的缓冲体系中进行,不易引发副反应。
在偶联过程中,NHS Ester 会在水解前与胺基形成稳定共价键,因此建议使用新鲜溶液操作,并在无游离胺存在的条件下进行反应。反应后未反应的染料可通过色谱、透析或离心超滤方式去除。
应用场景
6-Carboxyrhodamine 110 NHS Ester 在多个生物成像与分析领域均具有广泛用途。以下是常见的应用方向:
生物分子标记
通过 NHS 酯对蛋白质、肽或核酸的修饰,可构建稳定的荧光标记分子,用于蛋白示踪、受体结合实验、细胞内追踪等。该染料在标记后不会显著影响分子结构或活性,适合活体细胞实验。
荧光显微成像
由于其明亮的绿色荧光和优良的光稳定性,Rhodamine 110 衍生物被广泛用于共聚焦显微镜成像。在不易漂白且对绿色激发敏感的系统中,能提供持续、清晰的信号。
FRET 实验设计
作为能量受体或供体,6-Carboxyrhodamine 110 可参与构建荧光共振能量转移探针,用于实时检测分子间作用、构象变化或酶促反应等过程。
流式细胞分析
其激发和发射波长与流式细胞仪常见的 488 nm 激光兼容,可在 FITC 或 Alexa Fluor 488 通道下进行检测,适合多参数分析实验。
荧光探针合成
作为前体染料,6-Carboxyrhodamine 110 NHS Ester 可用于合成多功能探针,如生物传感器、定位探针、环境响应性荧光分子等,便于后续的结构修饰与功能扩展。
操作建议与注意事项
实验过程中,为保证染料的反应效率与标记质量,需注意以下操作建议:
- 染料应避光、干燥、低温保存(–20°C),使用前在干燥条件下回温;
- 建议使用无胺缓冲液(如 PBS、HEPES)进行偶联反应,避免 Tris、乙醇胺等干扰成分;
- 染料推荐先用 DMSO 或 DMF 溶解制备母液(1–10 mM),现配现用;
- 标记后通过透析、凝胶过滤、超滤等方式纯化产物,去除未偶联染料;
- 储存标记产物时需避光,并考虑添加防腐剂或*氧剂以延长保存时间;
总结
6-Carboxyrhodamine 110 NHS Ester 是一种高效、稳定的绿色荧光标记试剂,具有良好的光谱性质与反应活性。其在蛋白质修饰、荧光成像、细胞分析及分子探针开发等研究中展现了可靠性能。得益于其可与 488 nm 激光系统兼容,成为实验室常用的绿色荧光染料之一。对于需要高亮度、良好水溶性和稳定性的标记应用,该染料是一种值得考虑的选择。
6-Carboxyrhodamine 110 NHS Ester
物理形态: 可根据需求提供固体、粉末或溶液形式
储存条件: 建议冷藏保存,以维持产品的稳定性和活性
推荐试剂: 150173-78-7,BODIPY 576/589 CF 568 CTB Oregon Green488 2183440-37-9,TCO-PEG9-maleimide CAS:1845691-47-5,6-FAM-OtBu 1215204-46-8,N-ε-propargyloxycarbonyl-L-lysine BG-PEG4-Amine 2087490-43-3,JQ1-TCO 2250217-33-3,TCO-PEG2-NHS Ester 2250216-92-1,Propargyl-PEG3-Triethoxysilane AF350 Concanavalin A|AF350 Con A Sulfo Cyanine5-Alendronate,Sulfo-Cy5 AlN 228272-52-4,Cyanine3B NHS ester 69075-42-9,5-Ethynyl uridine
备注: 信息整理 / 编辑:kx