Phalloidin-iFluor 488,鬼笔环肽-iFluor 488纯化与表征

Phalloidin-iFluor 488,鬼笔环肽-iFluor 488纯化与表征

Phalloidin-iFluor 488,鬼笔环肽-iFluor 488纯化与表征

Phalloidin-iFluor 488是一种将鬼笔环肽(Phalloidin)与绿色荧光染料iFluor 488共价结合的复合物,广泛用于细胞生物学领域中对细胞骨架中纤维状肌动蛋白(F-actin)的高灵敏度标记与成像。该标记物通过结合Phalloidin对F-actin的高度特异性和iFluor 488优异的荧光性能,实现对细胞骨架结构的精确观察与研究。

在纯化过程中,Phalloidin-iFluor 488通常通过化学合成得到,随后采用高效液相色谱(HPLC)技术进行分离和纯化。HPLC能够有效区分未反应的游离染料、未偶联的Phalloidin分子以及成功偶联的目标产物,保证最终产品的纯度。纯化过程常选用反相C18柱,利用染料和肽链的疏水性差异进行分离,流动相多采用含一定比例有机溶剂(如乙腈)和水的缓冲体系,通过梯度洗脱实现组分分离。纯度通常通过峰面积和保留时间进行定量评估,保证产品达到高纯度标准。

产品的结构表征主要依赖于多种分析技术。首先,紫外-可见光谱(UV-Vis)用于测定标记物的吸收特性,确认iFluor 488染料的特征吸收峰是否存在且未受破坏,通常在490 nm附近出现显著吸收峰。其次,荧光光谱测定显示其发射峰约在515 nm左右,确保标记物具备优异的绿色荧光性能。核磁共振(NMR)和质谱(MS)分析则用于确认Phalloidin与iFluor 488的共价结合,质谱可检测到标记后分子的分子量变化,验证偶联的成功。红外光谱(FTIR)还可辅助检测酰胺键的形成,进一步确认偶联结构。

此外,产品的纯度和质量还通过毛细管电泳(CE)或SDS-PAGE等技术进行辅助检测,以排除可能的多聚体或未反应组分。热重分析(TGA)和差示扫描量热(DSC)可评估复合物的热稳定性,确保其在储存和应用过程中保持结构完整。

Phalloidin-iFluor 488具有良好的水溶性和生物相容性,且光稳定性优越,适合于荧光显微镜、共聚焦显微镜及流式细胞术中的应用。通过该标记物,可实现细胞内F-actin的高分辨率可视化,支持对细胞骨架形态、动力学和相关细胞过程的深入研究。

总之,Phalloidin-iFluor 488经严格的纯化流程和多重表征手段验证,保证了其结构的完整性和功能的可靠性。其结合了鬼笔环肽的特异结合能力与iFluor 488的高效荧光特性,为细胞生物学研究提供了强有力的工具,促进了细胞骨架相关科学探索的精细化发展。

产品名称:Phalloidin-iFluor 488

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

厂家:齐岳生物

推荐产品:

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