AF488 NHS,全称为 Alexa Fluor 488 N-hydroxysuccinimide ester,是一种绿色荧光染料的活性酯形式。
NHS酯(N-hydroxysuccinimide ester)是一种常用的活性基团,能够高效地与蛋白质、肽类及其他含有自由氨基(-NH2)的分子发生共价结合,从而实现标记和偶联。
作用机理
AF488 NHS酯通过其活性酯基团与含有游离氨基的分子(如蛋白质的赖氨酸残基或多肽的N端氨基)发生亲核取代反应,形成共价酰胺键,实现荧光染料的共价偶联。这种反应条件温和,效率高,且生成的偶联物稳定。
偶联反应通常在pH 7.2-8.5的缓冲体系中进行(如碳酸盐缓冲液),以保证氨基的游离状态和NHS酯的活性。反应完成后,可以通过透析、凝胶过滤或层析等方法去除未反应的自由染料。
中文名称:Alexa Fluor 488活性酯
英文名称:AF488 NHS
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
供应:西安齐岳生物科技有限公司
应用领域
蛋白质和抗体标记
AF488 NHS酯可以高效地标记抗体或其他蛋白质,制备荧光免疫试剂,用于免疫荧光染色(IF)、免疫组化(IHC)、流式细胞术(FACS)等检测技术。
核酸和寡核苷酸标记
通过修饰带有氨基的寡核苷酸,可以实现核酸的荧光标记,应用于荧光原位杂交(FISH)、DNA/RNA探针制备等。
细胞追踪与示踪
利用AF488标记的蛋白或配体,可以追踪细胞内动态过程、定位特定细胞组分。
生物分子相互作用研究
通过标记受体、配体或酶,结合荧光共振能量转移(FRET)等技术,研究分子间相互作用及构象变化。
荧光显微镜与成像
由于其优异的光稳定性和亮度,AF488广泛用于共聚焦显微镜、超分辨显微镜等高端成像技术。
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