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产品名称:AF647-NHS,AF647活性酯的实验注意事项
实验注意事项
1 避光操作
所有步骤需在暗处进行:
使用铝箔包裹容器,避免荧光淬灭。
荧光显微镜观察时,缩短曝光时间以减少光损伤。
2 反应控制
NHS酯水解抑制:
使用无水溶剂(如DMSO)溶解AF647-NHS,避免水分接触。
反应体系中可添加少量有机溶剂(如5% DMSO)提高溶解度,但需验证对目标分子活性的影响。
目标分子保护:
若目标分子含多个伯胺(如赖氨酸残基),需控制反应比例以避免过度标记导致活性丧失。
3 纯化与储存
纯化后验证:
质谱(MS):确认标记产物分子量(如AF647-抗体:抗体分子量+1,200 Da)。
荧光光谱:检测激发/发射波长是否符合AF647特性。
储存条件:
短期储存:4℃避光保存(≤1周),可添加0.1% BSA防止吸附。
长期储存:-20℃分装冻存(避免反复冻融),可保存数月至一年,添加50%甘油可进一步提高稳定性。
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