Sulfo-SANPAH是一种广泛应用于生物材料科学和细胞生物学领域的交联试剂。它是一种水溶性的、光活化型的异功能性交联剂,兼具NHS活性酯和光敏叠氮基团(azido group)。该化合物能够在无水或水溶液中,通过NHS活性酯部分与含有游离氨基的蛋白质或表面分子形成共价键;同时,经过紫外光照射后,其叠氮基团会生成高度反应性的中间体,能与多种化学基团(如C–H键)非特异性结合,因而实现与各种材料表面或非生物基底的有效交联和功能化
常用名6-[(4-叠氮-2-硝基苯基)氨基]己酸磺酸基琥珀酰亚胺酯
英文名sulfosuccinimidyl 6-((4-azido-2-nitrophenyl)amino)hexanoate
CAS号102568-43-4
分子量470.41
分子式C16H18N6O9S
作用机制
Sulfo-SANPAH是异功能交联剂,其反应过程可分为两个阶段:
NHS酯阶段(共价接枝)
在pH 7.2–8.5的缓冲液中,NHS酯能够特异性与蛋白质或多肽中赖氨酸等游离氨基发生亲核取代反应,生成稳定的酰胺键。这一步骤使Sulfo-SANPAH牢固地附着在目标蛋白分子上。
光活化阶段(表面交联)
经过紫外光(一般365 nm)照射后,分子中的叠氮基团产生高度活性的nitrene自由基,这种中间体可以与周围非极性的C–H键(例如材料表面的聚合物链、细胞膜脂质等)发生非特异性共价结合。
该阶段实现了蛋白与非生物表面(如聚合物膜、玻璃、金属氧化物等)的牢固连接,广泛应用于材料表面修饰和细胞培养基底的功能化。
四、主要应用
生物材料表面功能化
Sulfo-SANPAH被广泛用于将细胞外基质蛋白(如胶原蛋白、纤连蛋白、层粘连蛋白)共价固定到合成材料或生物相容性支架表面。这样可显著改善材料的细胞粘附和生长性能,促进细胞与基质的相互作用。
细胞培养基底改性
通过Sulfo-SANPAH修饰的基底能够提供良好的生物活性和力学支持,适用于干细胞培养、组织工程以及细胞信号研究。
生物传感器和芯片制备
利用其高效交联能力,Sulfo-SANPAH可用于将抗体、酶或受体分子固定于传感器表面,实现高灵敏度的生物检测和分析。
蛋白质交联与免疫沉淀
通过该试剂交联蛋白质复合物,有助于研究蛋白质相互作用和复合物组装。
组织工程和再生医学
利用其交联蛋白质的能力,改进组织工程支架,促进细胞定向生长和分化。
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