Crosslinked Allophycocyanin交联别藻蓝蛋白的蛋白交联步骤

标题:Crosslinked Allophycocyanin交联别藻蓝蛋白

【🍬参数信息】

英文名称:Crosslinked Allophycocyanin

中文名称:交联别藻蓝蛋白

激光通道:633-647nm

Ex /Em:651/660nm

滤片设置:Cy5

摩尔吸光系数:700,000 (cm-1M-1)

光量子产率:0.68

分子量:~105,000

外观:溶液

纯度:≥95%

【简单概述】

交联别藻蓝蛋白是通过化学交联技术对天然别藻蓝蛋白(Allophycocyanin, APC)进行修饰的产物。

天然APC是从红藻、蓝绿藻(如螺旋藻)中提取的藻胆蛋白(Phycobiliprotein),由α和β亚基以(αβ)₃形式组成三聚体结构,分子量约105 kDa。

每个亚基含一个藻蓝素发色团(Phycocyanobilin, PCB),具有高光吸收率和高荧光量子产率。

交联的核心操作:通过化学方法(如双功能试剂SMCC/SPDP)在α和β亚基间形成共价键(如硫醚键),增强其结构稳定性,同时保留天然APC的光谱特性。

【使用方法】

蛋白交联步骤(以抗体标记为例)

硫醇化蛋白X(如抗体):

用SPDP(succinimidyl 3-(2-pyridyldithio)propionate)修饰赖氨酸残基,摩尔比5:1–10:1(SPDP:蛋白)。

还原剂TCEP解离保护基团,生成游离硫醇(-SH)。

马来酰亚胺化蛋白Y(CL-APC):

用SMCC(succinimidyl maleimide)修饰,摩尔比10:1–20:1(SMCC:蛋白)。

偶联反应:

将硫醇化蛋白X与马来酰亚胺化CL-APC按1:1摩尔比混合,室温反应3小时形成稳定硫醚键。

用NEM(N-ethylmaleimide)封闭剩余硫醇基团,避免非特异性结合。

【相关试剂】

FM 2-10膜电位荧光探针

FM 4-64膜电位荧光探针

Chloramphenicol, USP Grade

Carbenicillin,Disodium Salt

Tide Quencher 6WS马来酰亚胺

Amyloid β Peptide 1-42,Human

pCAMBIA1305.1 Plant Expression Vector

pCAMBIA1305.2 Plant Expression Vector

E coli C41(DE3) Strain大肠杆菌C41(DE3)甘油菌

SYTO 9 (10,000× in DMSO) LAMP用核酸染料

N-Acetyl-D-lactosamine (LacNAc) N-乙酰-D-乳糖胺

6'-Sialyllactose Sodium Salt (6'-SL) 6'-唾液乳糖钠盐

以上资料由西安强化生物科技有限公司xxn整理!

本试剂仅适用于科研实验,敬请知悉。

特别声明:[Crosslinked Allophycocyanin交联别藻蓝蛋白的蛋白交联步骤] 该文观点仅代表作者本人,今日霍州系信息发布平台,霍州网仅提供信息存储空间服务。

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