6-TAMRAmaleimide,6-羧基四甲基罗丹明马来酰亚胺的反应条件与偶联策略
6-TAMRA Maleimide(6-羧基四甲基罗丹明马来酰亚胺)是一种常用于生物分子标记的荧光染料,其特有的马来酰亚胺基团能够与巯基反应,适用于含有半胱氨酸残基的蛋白质、多肽或其他含硫化合物的选择性修饰。这种选择性的共价偶联使其在构建荧光探针、生物标记物以及进行分子追踪等方面具备广泛的应用潜力。其出色的荧光性质和化学反应活性使其成为各种生物与化学研究中较为理想的荧光试剂之一。
一、化学结构与性质
6-TAMRA(6-羧基四甲基罗丹明)是一种罗丹明类染料,其分子结构由芳香环和酯基组成,赋予其在可见光范围内的优良荧光性能。马来酰亚胺是一种对巯基具有高度反应活性的亲电子基团,在生理pH条件下能与巯基快速而稳定地形成硫醚键。6-TAMRA与马来酰亚胺的结合赋予该染料选择性标记硫醇类分子的能力,而不易与胺类或羟基发生反应,避免非特异性结合。
6-TAMRA Maleimide的激发波长约为546–555 nm,发射波长为570–580 nm,在显微成像和流式细胞术中能提供明亮而清晰的荧光信号,适合用于多重荧光检测系统中与其他波段荧光染料配合使用。
二、反应条件与偶联策略
6-TAMRA Maleimide与目标分子巯基之间的反应属于Michael加成反应,通常在温和的条件下即可完成,反应条件主要包括以下几个方面:
1. 溶液条件
该反应一般在中性至略偏碱性的缓冲液中进行,pH范围建议在6.5–7.5之间。在该范围内,马来酰亚胺对巯基反应性高,而其水解速率较低,有助于提高偶联效率。常用的缓冲液包括磷酸缓冲液(PBS)、HEPES缓冲液等,但应避免使用含有还原剂(如DTT或β-巯基乙醇)的溶液,因为这类还原剂也含有巯基,会与马来酰亚胺发生竞争反应。
2. 温度与时间
反应通常在室温(20–25°C)下进行30分钟至2小时。该条件有利于确保反应的专一性与效率,并减少副反应的发生。在某些情况下可适当延长时间或稍微升温,以提高低反应性样品的标记效率。
3. 溶剂选择
6-TAMRA Maleimide在DMSO、DMF等有机溶剂中具有良好溶解性,因此可先以少量有机溶剂溶解后再稀释至水相缓冲液中使用。应控制有机溶剂在反应体系中的比例一般不超过10%,以避免生物样品失活或聚集。
4. 反应后处理
反应完成后,为去除未反应的染料分子,通常采用透析、凝胶过滤、超滤或层析纯化等方式进行处理,以获得纯净的标记产物。所得的标记物可直接用于后续成像或分析实验。
产品名称:6-TAMRAmaleimide,6-羧基四甲基罗丹明马来酰亚胺
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:齐岳生物
推荐产品:
174137-97-4
NO2A-(t-Bu ester)
1,4,7 - 三氮杂环壬烷-1,4 -二乙酸-7-叔丁酯
174137-97-4
NO2A-(t-Bu ester)
1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三乙酸-10-叔丁酯
174138-01-3
仅用于科研,不能用于人体。小编axc