Hydroxystilbamidine (FluoroGold)的操作步骤(超详细),223769-64-0

标题:Hydroxystilbamidine (FluoroGold) 羟芪巴脒(荧光金)

【🍬参数信息】

英文名称:Hydroxystilbamidine (FluoroGold)

中文名称:羟芪巴脒(荧光金)

CAS NO:223769-64-0

分子式:C18H24N4O7S2

分子量:472.54

Emission (Em):625

Excitation (Ex):360

外观:黄色粉末

纯度:≥95%

储存条件:-20℃避光干燥

生产厂商:西安强化生物科技

【简单概述】

Hydroxystilbamidine bis(methanesulfonate) 是一种能够结合 DNA🧬 和 RNA 的染料,是一种荧光阳离子染料,常用作逆行神经元示踪剂,也被发现是细胞核糖核酸酶的强效抑制剂。

【操作流程(组织学染色)】

(一)染料浓度

1-10%的羟芪巴脒都得以成功应用。先实验建议使用4%浓度。如果在注射位点发生不理想的坏死或标记太强烈,将浓度降低到2%。

(二)染料注射

①压力注射:这可能是使用最频繁的用法。注射体系范围从0.05-1µl,典型为0.1-0.2µl。

②晶体:示踪剂的晶体可从微量移液枪的枪尖注射。

(三)固定

虽然任何固定或不做固定都可,但含4%多聚甲醛的PBS是最常使用的。含高浓度重金属的固定剂会淬灭荧光,而高浓度的戊二醛(>1%)也许增加背景荧光。

(四)组织化学处理

含羟芪巴脒的组织可能依照任何通用的组织学技术来作处理。固定组织的冰冻切片常使用。

(五)联用技术

此处切片可能需进一步处理来做第一种标记比如放射性自显影、HRP组织化学术、免疫细胞化学、第二种荧光示踪剂、荧光复染等等。

(六)裱贴、透化和盖片

切片通常裱贴在明胶包被的载玻片、空气干燥、浸在二甲苯内,之后用非荧光的DPX封片剂来封片和盖片。

切片可能用分级纯来脱水,除非这一步与第二种染料不兼容。

如果羟芪巴脒与荧光免疫细胞化学组合,之后切片需空气干燥,并且直接用DPX盖片。

(七)观察和成像

羟芪巴脒可以用荧光显微镜🔬来观察。当用中性pH缓冲液处理组织,发射光呈金色;而当用酸性pH缓冲液(比如pH 3.3)处理组织时,发射光呈蓝色。

可以用数码机或胶片机拍摄。绝大多数曝光时间范围从10~60s曝光,具体取决于物镜放大倍数和标记强度。30s曝光大概是平均的。

多重曝光可能采用来同时观察羟芪巴脒和另一个示踪剂。因此,UV将与明场照明组合以同时定位羟芪巴脒和HRP或放射自显影的银粒。

类似地,蓝光激发也可能联合使用同时观察FITC的绿色发光,而绿色激发光也可能用于同时观察碘化丙啶或溴化乙锭的红色发光。

【相关试剂】

Zeatin玉米素

CDCFDA,SE

Inosine 5-diphosphate

ReadiLink mFluor 700

(±)-Jasmonic acid茉莉酸

YPDA Agar Medium YPDA琼脂培养基

YPDA Medium YPDA液体培养基

Minimal SD Agar Base SD琼脂基础培养基

Minimal SD Base SD基础培养基

Stigmasterol Glucoside 豆甾醇葡萄糖苷

pCAMBIA1300 Plant Expression Vector

pCAMBIA1301 Plant Expression Vector

pCAMBIA1305.1 Plant Expression Vector

(±)-Jasmonic Acid-Isoleucine茉莉酸-异亮氨酸

12-oxo Phytodienoic Acid (OPDA)12-氧代植物二烯酸

以上资料由西安强化生物科技有限公司xxn整理!

本试剂仅适用于科研实验,敬请知悉。

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