解答篇:9025-65-4,全能核酸酶(带Strep标签)的使用的常见问题解析(902-25×12+156)

解答篇:9025-65-4,全能核酸酶(带Strep标签)的使用的常见问题解析(902-25×12+156)
&核心结构

来源与组成

来源于粘质沙雷氏菌,通过基因工程重组表达。

结构:由两个约26.7–30 kDa的亚基组成,形成二聚体结构。

标签:带Strep-tag II标签,便于通过Strep-Tactin XT磁珠或树脂高效去除。

配方:10mM Tris (pH 7.4)、500mM NaCl、2mM MgCl₂、50%甘油缓冲液。

核心功能

非特异性核酸降解:切割任意核苷酸间的磷酸二酯键,将DNA🧬/RNA完全消化为2-8个碱基的5'-磷酸寡核苷酸。

广谱性:降解所有形式的核酸。

高兼容性:耐受高盐、去污剂、变性剂及极端pH。

标签功能

Strep-tag II便于在纯化后通过亲和层析快速去除酶自身,避免污染目标产物。

试剂信息

英文名称:Benzonase Nuclease

中文名称:全能核酸酶(带Strep标签)

CAS NO:9025-65-4

酶活性值:≥250 U/μL

比活性值:≥1×106U/mg蛋白

蛋白酶:未检出

合适pH:8.0(工作范围pH6-10)

合适温度:37℃(工作范围0-42℃)

纯度:≥95%

储存条件:-20℃避光干燥

生产厂商:西安强化生物科技

&常见问题

(1)使用场景与加入时机

问:何时加入全能核酸酶?

答:在发酵步骤后、蛋白收集前加入。例如:

组织样品:研磨后加裂解液,每100~200µL裂解液加1~5µL酶,室温孵育30min。

细菌样品:裂解或研磨后,每100µL样品加1~5µL酶。

降低粘度/去除核酸污染:在蛋白纯化前加入。

(2)稀释方法与用量

问:如何稀释?每次用量多少?

答:

稀释比例:1:1000~1:20000(终浓度)。

稀释缓冲液:20mM Tris-Cl pH8.0 + 2mM MgCl₂ + 2mM NaCl(现配现用)。

长期保存稀释液:添加50%甘油,-20℃保存。

梯度测试建议:根据样品类型调整,如高浓度蛋白需增加酶量。

(3)反应条件优化

问:温度/pH不理想时如何提高效果?

答:

温度范围:0~42℃。

pH范围:6~10。

非最优条件:延长孵育时间或增加酶量。

(4)抑制因子与兼容性

问:哪些物质会抑制活性?

答:

必需因子:Mg²⁺。

抑制剂:EDTA、高盐、高磷酸盐浓度。

兼容试剂:

6M尿素、0.1% SDS、0.4% Triton X-100、1mM PMSF。

含DTT/β-巯基乙醇的还原剂。

注意事项:避免与含EDTA的蛋白酶抑制剂共用。

&相关试剂

(±)-Jasmonic acid

YPDA Agar Medium

SDS Lysis Buffer SDS 裂解液

NP-40 Lysis Buffer NP-40 裂解液

RIPA Lysis Buffer(Weak)RIPA裂解液(弱)

RIPA Lysis Buffer(Strong)RIPA裂解液(强)

RIPA Lysis Buffer(Medium)RIPA裂解液(中)

Benzonase Nuclease 全能核酸酶(无内毒素)

Benzonase Nuclease 全能核酸酶(不含标签)

Benzonase Nuclease全能核酸酶(带Strep标签)

Ribonuclease A (RNase A) from Bovine Pancreas

Deoxyribonuclease I (DNase I), ≥500 units/mg protein

Deoxyribonuclease I (DNase I), ≥2,000 units/mg protein

西安强化生物科技有限公司xxn对以上内容进行了系统整理!

本试剂用于科研领域,其他用途概不适用!

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