马来酰亚胺-三聚乙二醇-葡萄糖醛酸-MABC-单甲基奥瑞他汀E,用于蛋白质抗体修饰的使用步骤(马来酰亚胺溶于什么有机溶剂)

马来酰亚胺-三聚乙二醇-葡萄糖醛酸-MABC-单甲基奥瑞他汀E,用于蛋白质抗体修饰的使用步骤(马来酰亚胺溶于什么有机溶剂)
一、物化性质

保存条件:避光、-20°C储存,避免反复冻融

溶解性:溶于水以及部分有机溶液。

英文名称:Mal-PEG3-Glucuronide-MABC-MMAE

中文名称:马来酰亚胺-三聚乙二醇-葡萄糖醛酸-MABC-单甲基奥瑞他汀E

分子式:C69H104N8O23

分子量:1413.62

规格:5mg,10mg,25mg

纯度:95%+

二、功能结构与组成

马来酰亚胺基团(Mal)

功能:与生物分子中的巯基(-SH)特异性反应,形成稳定的硫醚键,实现蛋白质、抗体等大分子的定点修饰。

反应条件:pH 6.5–7.5 时反应效率最高。

三聚乙二醇连接臂(PEG3)

功能:

增强水溶性、生物相容性和分子灵活性。

减少免疫原性,提高药物稳定性。

葡萄糖醛酸基团(Glucuronide)

功能:作为 酶响应性连接子,在细胞内被β-葡萄糖醛酸酶水解,释放活性药物。

MABC连接子

功能:在还原性环境(如肿瘤细胞内高谷胱甘肽浓度)下断裂,实现药物可控释放。

MMAE(单甲基奥瑞他汀E)

功能:强效微管蛋白抑制剂,通过阻断微管聚合抑制细胞分裂,杀伤癌细胞。

三、核心使用步骤(用于蛋白质/抗体修饰)

样品准备

将目标蛋白质或抗体溶解于 pH 7.4 的磷酸盐缓冲液(PBS)中。

避免使用含伯胺(如Tris、甘氨酸)或巯基的缓冲液,否则会竞争反应位点。

偶联反应

按摩尔比 1:1 至 1:10(试剂:蛋白质)加入Mal-PEG3-Glucuronide-MABC-MMAE。

室温避光反应 1-2 小时。

关键控制:反应体系 pH 需严格保持在 6.5–7.5,以确保马来酰亚胺基团与巯基高效结合。

纯化

使用以下任一方法去除未反应的试剂和小分子副产物:

透析(针对大分子保留)

凝胶过滤层析(如尺寸排阻色谱)

高效液相色谱(HPLC)

纯化后需更换缓冲液:建议置换为 PBS 或含 0.2% Tween 的稳定化缓冲液。

四、关联试剂

FAPI的荧光成像试剂

Norbornene-5-TAMRA

IR-808 Maleimide

AlexaFluor488 TCO

AF594 Concanavalin A

Rhodamine-N3 chloride

Alexa Fluor488 tetrazine

Alexa Fluor488 DBCO, 5-isomer

99724-21-7;2-(Boc-aminomethyl)azetidine

1,3,5-Tri-O-acetyl-2-deoxy-D-erythro-pentofuranose

Indocyanine Green-Fibroblast Activation Protein Inhibitor

tert-butyl 2-(2,5-dioxo-2H-pyrrol-1(5H)-yl)ethylcarbamate

(本文内容由陕西新研博美生物科技有限公司木南整理)

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