ATCC15834 Electrocompetent Cell的使用方法【超详细】

ATCC15834 Electrocompetent Cell的使用方法【超详细】

标题:ATCC15834 Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞

【🍬参数信息】

英文名称:ATCC15834 Electrocompetent Cell

中文名称:ATCC15834农杆菌电转感受态细胞

运输:低温运输

规格:10×50μl,50×50μl

纯度:≥95%

储存条件:-20℃避光干燥

生产厂商:西安强化生物科技

【简单概述】

ATCC15834电转感受态细胞是一种发根农杆菌菌株,其核心特征包括:

基因型:携带天然 pRi15834 农杆碱型Ri质粒,赋予其特定的植物转化能力。

宿主范围:适用于多种植物(双子叶植物和部分单子叶植物),专长于诱导紫杉醇、青蒿等药用植物的毛状根。

制备工艺:经特殊工艺优化,适合大质粒转化(如基因组文库),转化效率高。

【使用方法】

一、实验前准备

安全防护:穿实验服并戴一次性手套🧤操作。

电击杯处理:

将0.1 cm电击杯和杯盖从75%乙醇储存液中取出,倒置于干净吸水纸上5分钟沥干水分,再正置5分钟使乙醇充分挥发。

立即插入碎冰中压实,杯顶离冰面0.5 cm以便盖盖,冰浴5分钟充分降温。

感受态细胞解冻:取-80℃保存的感受态细胞插入冰中5分钟,待完全融化。

二、质粒与感受态细胞混合

质粒要求:

质粒DNA🧬需用试剂盒抽提,双蒸水溶解。

用量建议:首次使用需预实验优化,推荐0.01-1 μg质粒DNA🧬/100 μl感受态细胞。

混合操作:

将质粒加入解冻的感受态细胞中,用移液枪轻轻吹打混匀(避免气泡)。

冰上静置5分钟。

三、电转操作

电击参数设置:

电容(C)= 25 μF,电阻(PC)= 200 ohm,电压(V)= 2400 V(Bio-rad电转仪参考参数)。

电击步骤:

将混合液快速转移至预冷的电击杯中,盖紧杯盖。

吸干电击杯外壁水分,放入电转槽。

启动电击,完成后立即将电击杯插回冰中冷却2分钟。

四、复苏与培养

复苏培养:

向电击杯中加入700 μl 无抗生素的TY液体培养基。

用移液枪吸出混合液,转移至无菌离心管。

28℃、200 rpm振荡培养2-3小时。

涂板与培养:

6000 rpm离心1分钟,弃上清(留约100 μl)。

轻轻吹打重悬菌体,涂布于含 卡那霉素(50 μg/ml) 的TY平板上。

28℃倒置培养48-72小时。

【相关试剂】

Cy3 生物素偶联物

MPP+ iodide

Tide Quencher 1胺

Tide Quencher 3胺

Tide Quencher 7WS

BL21(DE3)Competent Cell

(1S,3R)-RSL3 (GPx4 inhibitor)

BCP-T.A. (Ferroptosis inducer)铁死亡诱导剂

Decylubiquinone (mPTP inhibitor) 癸基泛醌

TOP10 Electrocompetent cell 大肠杆菌电转感受态细胞

EPI400 Electrocompetent cell 大肠杆菌电转感受态细胞

DH10B Electrocompetent cell 大肠杆菌电转感受态细胞

MPP+ iodide (N-Methyl-4-Phenylpyridinium Iodide)

Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell

Rosetta-gami B(DE3) Chemically Competent Cell

Ar 1193 Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞

以上资料由西安强化生物科技有限公司xxn整理!

本试剂仅适用于科研实验,敬请知悉。

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