标题:ATCC15834 Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞
【🍬参数信息】英文名称:ATCC15834 Electrocompetent Cell
中文名称:ATCC15834农杆菌电转感受态细胞
运输:低温运输
规格:10×50μl,50×50μl
纯度:≥95%
储存条件:-20℃避光干燥
生产厂商:西安强化生物科技
【简单概述】ATCC15834电转感受态细胞是一种发根农杆菌菌株,其核心特征包括:
基因型:携带天然 pRi15834 农杆碱型Ri质粒,赋予其特定的植物转化能力。
宿主范围:适用于多种植物(双子叶植物和部分单子叶植物),专长于诱导紫杉醇、青蒿等药用植物的毛状根。
制备工艺:经特殊工艺优化,适合大质粒转化(如基因组文库),转化效率高。
【使用方法】一、实验前准备
安全防护:穿实验服并戴一次性手套🧤操作。
电击杯处理:
将0.1 cm电击杯和杯盖从75%乙醇储存液中取出,倒置于干净吸水纸上5分钟沥干水分,再正置5分钟使乙醇充分挥发。
立即插入碎冰中压实,杯顶离冰面0.5 cm以便盖盖,冰浴5分钟充分降温。
感受态细胞解冻:取-80℃保存的感受态细胞插入冰中5分钟,待完全融化。
二、质粒与感受态细胞混合
质粒要求:
质粒DNA🧬需用试剂盒抽提,双蒸水溶解。
用量建议:首次使用需预实验优化,推荐0.01-1 μg质粒DNA🧬/100 μl感受态细胞。
混合操作:
将质粒加入解冻的感受态细胞中,用移液枪轻轻吹打混匀(避免气泡)。
冰上静置5分钟。
三、电转操作
电击参数设置:
电容(C)= 25 μF,电阻(PC)= 200 ohm,电压(V)= 2400 V(Bio-rad电转仪参考参数)。
电击步骤:
将混合液快速转移至预冷的电击杯中,盖紧杯盖。
吸干电击杯外壁水分,放入电转槽。
启动电击,完成后立即将电击杯插回冰中冷却2分钟。
四、复苏与培养
复苏培养:
向电击杯中加入700 μl 无抗生素的TY液体培养基。
用移液枪吸出混合液,转移至无菌离心管。
28℃、200 rpm振荡培养2-3小时。
涂板与培养:
6000 rpm离心1分钟,弃上清(留约100 μl)。
轻轻吹打重悬菌体,涂布于含 卡那霉素(50 μg/ml) 的TY平板上。
28℃倒置培养48-72小时。
【相关试剂】Cy3 生物素偶联物
MPP+ iodide
Tide Quencher 1胺
Tide Quencher 3胺
Tide Quencher 7WS
BL21(DE3)Competent Cell
(1S,3R)-RSL3 (GPx4 inhibitor)
BCP-T.A. (Ferroptosis inducer)铁死亡诱导剂
Decylubiquinone (mPTP inhibitor) 癸基泛醌
TOP10 Electrocompetent cell 大肠杆菌电转感受态细胞
EPI400 Electrocompetent cell 大肠杆菌电转感受态细胞
DH10B Electrocompetent cell 大肠杆菌电转感受态细胞
MPP+ iodide (N-Methyl-4-Phenylpyridinium Iodide)
Rosetta-gami 2(DE3) Chemically Competent Cell
Rosetta-gami B(DE3) Chemically Competent Cell
Ar 1193 Electrocompetent Cell 农杆菌电转感受态细胞
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本试剂仅适用于科研实验,敬请知悉。