Alexa Fluor 555 Azide(简称 AF555-N3)是一种水溶性红橙色荧光染料,属于 Alexa Fluor 系列。Alexa Fluor 染料以其高荧光亮度、优异的光稳定性和良好的水溶性闻名,广泛应用于生物化学、分子生物学和细胞生物学领域。AF555-N3 是 Alexa Fluor 555 的叠氮化物衍生物,其中末端引入了叠氮基(–N3),使其能够与末端炔基或环辛炔衍生物通过“点击化学”共价连接。
结构特征
Alexa Fluor 555 核心
AF555 的核心是一种共轭的苯基和吡咯结构体系,提供强烈的吸收和发射性能。
共轭体系使其在可见光范围内表现为橙红色荧光,吸收峰约在 555 nm,发射峰约在 565–570 nm。
高量子产率和光稳定性使其适合长时间成像和多重荧光实验。
叠氮基修饰(–N3)
末端引入叠氮基,使 AF555-N3 能与炔基(–C≡C–)或环辛炔(DBCO)功能化分子通过 SPAAC(Strain-Promoted Azide-Alkyne Cycloaddition)进行铜自由点击反应。
这种反应条件温和、选择性高,不影响生物体系中其他官能团,适合活细胞标记。
水溶性修饰
Alexa Fluor 系列通常引入磺酸基(–SO3H)或羧基,增加水溶性和生物兼容性。
降低疏水性相互作用,减少非特异性吸附,提高荧光信号的特异性和可靠性。
名称:Alexa Fluor 555 Azide
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
供应:西安齐岳生物科技有限公司
化学反应特性
铜自由点击化学(SPAAC)
AF555-N3 可以与末端炔基分子或 DBCO 功能化生物分子快速反应生成 1,2,3-三唑环,形成稳定共价键。
反应无需铜催化剂,温和且生物相容性好,适合用于活细胞或敏感蛋白质标记。
反应选择性高
叠氮基特异性反应仅发生在炔基存在的分子上,不与天然氨基、羟基或巯基等官能团反应。
高选择性确保了标记的专一性,减少非特异性信号。
荧光稳定性
AF555-N3 在光照下稳定,适合长时间显微成像。
在水性缓冲液中表现出良好的荧光亮度和可重复性。
应用领域
蛋白质和多肽标记
可与炔基功能化蛋白质、多肽反应,实现共价荧光标记。
在免疫标记、Western blot、ELISA 和荧光成像中广泛应用。
核酸与寡核苷酸标记
可标记炔基修饰的寡核苷酸或 DNA🧬/RNA,实现荧光探针构建。
适用于原位杂交(FISH)、实时 PCR 和分子追踪实验。
细胞与组织成像
AF555-N3 可用于活细胞或固定细胞的表面或内部标记。
高水溶性和低非特异性结合确保了信号特异性和成像清晰度。
多重荧光实验
与其他荧光染料(如 Alexa Fluor 488、Cy5 等)组合使用,实现多通道荧光成像和共定位研究。
可用于流式细胞术、多色显微镜🔬和高通量成像平台。
生物正交化学研究
AF555-N3 是铜自由点击化学的重要工具,用于蛋白质、糖类或脂质的正交标记。
可构建功能化探针、追踪分子动力学或研究生物分子互作。
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