大鼠(Rat)活性氧簇(ROS)ELISA检测试剂盒
产品货号:DM-D9682
产品规格:48/96T
大鼠(Rat)活性氧簇(ROS)ELISA 科研试剂盒用于体外定量检测大鼠血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等样本中的 ROS 水平,基于双抗体夹心 ELISA 法,TMB 显色,450 nm 测定,标准曲线法定量。
试剂盒组成(示例,以说明书为准)
- 预包被 ROS 抗体微孔板(96T/48T)
- ROS 标准品(如 0–120 ng/mL 6 点,或冻干复溶后 28–1600 pg/mL)
- HRP 标记 ROS 检测抗体、20×/30× 浓缩洗涤液、样本稀释液、TMB 底物 A/B、终止液、封板膜
检测原理
- 包被抗体捕获样本中的 ROS,HRP 标记抗体形成 “夹心”;TMB 显色后加酸终止,450 nm 测 OD,与 ROS 浓度呈正相关。
样本类型与处理
- 血清:室温 2 h 或 4℃过夜凝固后约 1000×g 15–20 min 取上清;短期 4℃,长期 - 20℃/-80℃分装,避免反复冻融。
- 血浆:EDTA 或肝素抗凝,2–8℃约 1000×g 15 min 取上清;保存同血清。
- 组织匀浆:冰冷 PBS 漂洗后称重,按组织类型选裂解液匀浆,离心取上清。
- 细胞培养上清:1000×g 10–20 min 取上清。
操作要点(简版)
- 室温平衡试剂;设空白、标准品与样本复孔。
- 加样(如样本 10 μL + 样本稀释液 40 μL)→37℃孵育 60 min→洗涤 5 次。
- 加 HRP 结合物→37℃孵育→洗涤。
- 加 TMB 避光显色(如 15 min)→加终止液→15 min 内 450 nm 读板。
- 以标准品浓度对 OD 值绘制曲线,计算样本浓度;若先做 n 倍稀释,结果 ×n。
性能指标(典型,以说明书为准)
- 检测范围:常见为 7.5–120 ng/mL 或 28–1600 pg/mL;灵敏度:<1 ng/mL 或 6 pg/mL。
- 特异性:对结构类似物无明显交叉。
- 重复性:板内 CV<10%–15%,板间 CV<15%。
- 线性相关系数:R≥0.990。
保存与有效期
- 2–8℃避光保存,有效期约 6 个月;不同批次不宜混用。
注意事项
- 试剂使用前室温平衡;洗涤充分并拍干,避免残留影响 OD。
- TMB 底物 B 对光敏感,显色需避光;加终止液后尽快读数(如 15 min 内)。
- 若样本 OD 高于标准品上限,先用样本稀释液稀释后重测。