Alexa Fluor555-NHS水溶性红色荧光染料活性酯衍生物
AF555-NHS(Alexa Fluor 555-N-hydroxysuccinimide ester)是一种水溶性红色荧光染料活性酯衍生物,其核心为 Alexa Fluor 555 花青素染料,激发波长约 555 nm,发射波长约 565 nm。AF555-NHS 具有高量子产率、优良光稳定性及低背景荧光,广泛应用于蛋白质、抗体、寡核苷酸、多肽及纳米材料的荧光标记。其 N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯末端可与氨基(–NH₂)反应形成稳定的酰胺键,从而实现共价偶联。
AF555-NHS 的水溶性和高稳定性使其能够在生物体系中均匀分布,适用于体外标记、活细胞成像及多色荧光实验。其红色荧光信号具有良好的穿透性和低自发荧光干扰,适合复杂生物样品的分析。
二、化学组成与特性
Alexa Fluor 555 核心
多共轭花青素结构提供高亮度和长寿命荧光。
激发波长 555 nm、发射波长 565 nm,适用于红色荧光成像。
NHS 活性酯修饰
NHS 酯是一种高效亲电子化学基团,可与初级氨基反应生成酰胺键。
反应条件温和(pH 7–9),无需高温或强酸碱,保护生物分子结构。
偶联产物稳定,荧光性质不受影响。
水溶性与生物相容性
染料整体水溶性良好,可直接在 PBS 或水相体系中操作。
生物相容性高,适用于细胞内和体外标记实验。
三、制备方法概述
起始原料
Alexa Fluor 555 染料前体(含羧基或羟基功能化位点)。
N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和碳二亚胺类偶联试剂(如 DCC 或 EDC)。
有机溶剂如二氯甲烷(DCM)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)等。
活性酯化反应
在干燥有机溶剂中,将 Alexa Fluor 555 的羧基与 NHS、偶联剂混合。
在室温或低温条件下搅拌,使羧基活化为 NHS 酯。
反应一般持续数小时至一夜,确保羧基完全转化。
纯化步骤
通过硅胶柱层析或高效液相色谱(HPLC)去除未反应的起始物、偶联剂及副产物。
使用适当溶剂体系保证染料稳定性,并收集纯化的 AF555-NHS。
储存与处理
活性酯对水分敏感,纯品应储存于干燥条件下,低温避光保存。
溶解操作一般采用无水有机溶剂,如 DMSO,避免水分导致水解失活。
产品名称:Alexa Fluor555-NHS
纯度:95%+
规格:mg/g
厂家:齐岳生物
推荐产品:
CY5.5标记蔗糖
CY5.5-Transferrins
CY5.5修饰转铁蛋白
CY5.5-UrolithinA
CY5.5尿石素A
仅用于科研,不能用于人体。小编axc