一、产品概述
Asprosin 是一种由纤维蛋白原基因（FBN1）编码的蛋白质，在代谢调节和能量平衡中具有重要作用。本试剂盒通过夹心法检测 Asprosin，为相关研究提供了可靠的工具。
Abbexa小鼠Asprosin ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液及其他生物液体中小鼠 Asprosin 浓度的试剂盒。该试剂盒基于酶联免疫吸附测定（ELISA）技术，具有高特异性和灵敏度，适用于小鼠样本的检测。艾美捷作为Abbexa中国区代理商，为大家整理了一份小鼠Asprosin ELISA试剂盒中文说明书。
Abbexa小鼠Asprosin ELISA试剂盒（abx585287）基本信息
目标蛋白：Asprosin
反应性：小鼠
检测方法：比色法
检测范围：78 pg/ml - 5000 pg/ml
灵敏度：< 32 pg/ml
标准品形式：冻干
样本类型：血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液及其他生物液体
检测类型：定量
检测方法：夹心法（Sandwich）
二、试剂盒组成
本试剂盒包含以下主要组分：
预包被的 96 孔微孔板：预先包被有特异性抗体，用于捕获样本中的 Asprosin。
标准品：用于建立标准曲线，以定量分析样本中的 Asprosin 含量。
标准品稀释缓冲液：用于稀释标准品溶液，以获得不同浓度的标准系列。
洗涤缓冲液：用于在各步骤中清洗微孔板，去除未结合的成分，减少背景干扰。
检测试剂 A 和 B：用于夹心法检测，结合样本中的 Asprosin。
稀释液 A 和 B：分别用于稀释检测试剂 A 和 B，确保其在合适的工作浓度下发挥作用。
TMB 底物：用于显色反应，其颜色变化与 Asprosin 的含量呈正比关系。
终止液：用于终止反应，使颜色变化固定，便于在特定波长下测量吸光度。
封板膜：用于在反应过程中封闭微孔板，防止蒸发和交叉污染。
三、存储与有效期
运输条件：试剂盒在运输过程中应保持在 4℃。
存储条件：收到后，请按照试剂盒说明书中的存储说明进行存储。建议存储于 4℃。
有效期：本试剂盒的有效期至少为 6 个月。如需更长时间的有效期（最长可达 12 个月），请提前联系Abbexa。
稳定性：试剂盒的稳定性由活性损失率决定。在适当的存储条件下，有效期内的损失率小于 5%。为减少性能波动，应严格控制操作流程和实验室条件。强烈建议整个实验过程由同一位用户完成。
四、实验原理
本试剂盒采用夹心 ELISA 技术。预先在 96 孔板上包被有特异性抗体。将标准品、测试样本加入到孔中并孵育，样本中的 Asprosin 与包被抗体结合。随后加入检测试剂 A 和 B，形成夹心复合物。加入 TMB 底物后，只有含有 Asprosin 的孔才会产生蓝色产物，加入酸性终止液后会变为黄色。黄色的强度与结合在板上的 Asprosin 量成正比。在微孔板读数仪上以 450nm 波长光谱光度法测量 OD 值，从而可以计算出 Asprosin 的浓度。
五、实验步骤
1.设置标准、测试样本和对照孔：在预包被的微孔板上分别设置标准孔、测试样本孔和对照（零）孔，并记录它们的位置。建议每个标准和样本至少进行双份测量。
2.加样：向标准孔中加入 100uL 稀释后的标准品，向对照（零）孔中加入 100uL 标准品稀释缓冲液，向样本孔中加入 100uL 稀释后的样本。在 37℃下孵育 1 小时。
3.加入检测试剂 A：向每个孔中加入 100uL 检测试剂 A 工作溶液。用封板膜封住微孔板，在 37℃下孵育 1 小时。
4.洗涤：移除封板膜，弃去溶液。用 1X 洗涤缓冲液洗涤微孔板 3 次。
5.加入检测试剂 B：向每个孔中加入 100uL 检测试剂 B 工作溶液，封板后在 37℃下孵育 30 分钟。
6.再次洗涤：弃去溶液，用洗涤缓冲液按前一步骤所述方法洗涤微孔板 5 次。
7.加入 TMB 底物：向每个孔中加入 90uL TMB 底物。用封板膜封住微孔板，在 37℃下孵育 10 - 20 分钟。避免光照。孵育时间仅供参考，最佳时间应由最终用户确定。不要超过 30 分钟。
8.加入终止液：向每个孔中加入 50uL 终止液。立即在 450nm 波长下读取吸光度。
六、结果计算
本实验为夹心 ELISA，样本中 Asprosin 的浓度与其测量的吸光度呈正比关系。计算每个标准和样本的平均 OD450 值，并减去对照（零）孔的平均 OD450 值。绘制标准曲线，以标准浓度（X 轴）和相对 OD450 值（Y 轴）为坐标。可以从标准曲线上插值计算出样本中 Asprosin 的浓度。
七、实验精密度
1.批内精密度（同一批次内的精密度）：对低、中、高三个水平的 Asprosin 样本进行 20 次测试，均在同一块微孔板上进行。变异系数（CV%）=（标准差/平均值）× 100。批内精密度：CV < 10%。
2.批间精密度（不同批次之间的精密度）：对低、中、高三个水平的 Asprosin 样本在 3 块不同的微孔板上进行测试，每块微孔板上各有 8 个重复样本。批间精密度：CV < 12%。
八、注意事项
1.仅限研究使用：本产品仅供研究使用，不得用于诊断或治疗用途。
2.范围和灵敏度可能发生变化：范围和灵敏度可能会发生变化。
3.样本浓度要求：为获得准确结果，样本浓度必须稀释至试剂盒的中等范围内。
4.样本类型优化：请注意，Abbexa的试剂盒针对天然样本的检测进行了优化，而不是重组蛋白。Abbexa无法保证检测重组蛋白，因为它们可能具有与天然蛋白不同的序列或三级结构。
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