CY3-BSA(CY3 标记牛血清白蛋白)的共价偶联机制
CY3-BSA(CY3 标记牛血清白蛋白) 是通过将水溶性荧光染料 CY3(Cyanine3)与牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)共价偶联制备而成的功能化蛋白质。CY3 是一种中红色荧光染料,吸收峰约在550 nm,发射峰约在570 nm,具有高量子产率、窄发射谱带和良好的光稳定性。通过将 CY3 染料与 BSA 蛋白结合,可在保留蛋白生物活性的同时赋予其可视化能力,实现荧光成像、分子追踪和表面功能化研究。
在化学性质上,CY3-BSA 由两部分组成:
荧光染料部分(CY3):CY3 通常以 N-羟基琥珀酰亚胺(NHS ester)或异硫氰酸酯形式存在,能够与蛋白质表面的自由氨基(如赖氨酸残基)形成稳定的酰胺键。染料的共轭结构赋予分子强烈荧光信号,使蛋白在光学成像和定量分析中具有高灵敏度。
蛋白质核心部分(BSA):BSA 是一种大分子血浆蛋白,具有多种氨基酸侧链可用于化学修饰,分子量约为66 kDa。BSA 的疏水性和亲水性表面区域使其成为药物载体、抗原载体或表面修饰模板的理想蛋白平台。通过荧光染料的偶联,BSA 保留其原有的结构稳定性和生物相容性,同时获得可监测的光学信号。
表面功能化方面,CY3-BSA 的制备主要依赖于蛋白质表面的亲核氨基残基与 CY3-NHS ester 的共价偶联反应。具体表征如下:
共价偶联机制:CY3 的活性酯通过蛋白质赖氨酸侧链的氨基进行亲核攻击,形成稳定的酰胺键。反应通常在弱碱性缓冲液(pH 7.5–8.5)中进行,以确保氨基的亲核活性,同时降低蛋白质构象破坏和染料水解的风险。
偶联程度控制:通过调节 CY3 与 BSA 的摩尔比和反应时间,可控制标记位点数,避免过度标记导致蛋白质构象改变或功能丧失。典型标记程度为每个 BSA 分子偶联3–10个染料分子,以保证荧光强度和蛋白活性平衡。
纯化与表面修饰:反应完成后,CY3-BSA 通常通过透析、凝胶过滤色谱(如 Sephadex G-25)或超滤去除未反应的染料,获得高纯度标记蛋白。纯化后的 CY3-BSA 保留蛋白的表面功能和溶解性,同时染料分布均匀,形成稳定的荧光标记蛋白。
表面功能化特性:CY3-BSA 的表面不仅具有荧光信号,还保留 BSA 的疏水性、亲水性和配体结合位点,可进一步与其他生物分子、纳米材料或药物载体进行修饰或偶联。其表面功能化能力使其在生物传感器、药物递送、免疫分析及细胞成像实验中应用广泛。
产品名称:CY3-BSA(CY3 标记牛血清白蛋白)
纯度:95%+
规格:mg/g
厂家:齐岳生物
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc