MCA-SEVNLDAEFR-K(Dnp)-RR, Amide;438625 - 61 - 7

MCA-SEVNLDAEFR-K(Dnp)-RR, Amide;438625 - 61 - 7

1. 基本信息

  • 英文名称:MCA-SEVNLDAEFR-K(Dnp)-RR, Amide
  • 中文名称:7 - 甲氧基香豆素 - 丝氨酸 - 谷氨酸 - 缬氨酸 - 天冬酰胺 - 亮氨酸 - 天冬氨酸 - 丙氨酸 - 谷氨酸 - 苯丙氨酸 - 精氨酸 - N - (2,4 - 二硝基苯基)赖氨酸 - 精氨酸 - 精氨酸 - 酰胺
  • 氨基酸序列:7 - 甲氧基香豆素 - Ser - Glu - Val - Asn - Leu - Asp - Ala - Glu - Phe - Arg - N - (2,4 - 二硝基苯基)Lys - Arg - Arg - 酰胺
  • 单字母序列:MCA - SEVNLDAEFR - K(Dnp) - RR - NH₂
  • 三字母序列:MCA - Ser - Glu - Val - Asn - Leu - Asp - Ala - Glu - Phe - Arg - Lys(Dnp) - Arg - Arg - CONH₂
  • 分子量:约 1850.03 g/mol
  • 分子式:C₈₀H₁₁₅N₂₅O₂₆
  • 等电点:未明确数据,但因含有较多酸性氨基酸(Glu、Asp)和碱性氨基酸(Arg、Lys),等电点需根据各氨基酸解离常数及修饰基团综合计算 。
  • cas 号:438625 - 61 - 7
  • 外观性状:通常为白色至类白色粉末状固体 。

供应商:上海楚肽生物科技有限公司

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2. 结构信息

该多肽由 14 个氨基酸残基组成,并带有特殊修饰基团。N 端连接 7 - 甲氧基香豆素(MCA),这是一种荧光基团,在 320 - 380nm 波长激发下,会在 400 - 460nm 波长产生荧光,常用于多肽的荧光标记,便于检测和追踪 。第 11 位赖氨酸(Lys)的 ε - 氨基连接 2,4 - 二硝基苯基(Dnp),该修饰会影响多肽的电荷分布和空间结构,同时也可作为特定的识别或结合位点 。C 端为酰胺化(-NH₂)修饰,增强了多肽的稳定性,减少了 C 端羧基的离子化程度 。氨基酸残基间通过肽键连接,形成线性多肽骨架,其中酸性氨基酸(Glu、Asp)和碱性氨基酸(Arg、Lys)的侧链基团赋予其一定的电荷性质,侧链间可通过氢键、静电相互作用、疏水作用等维持多肽的局部构象 。

3. 作用机理及研究进展

  • 作用机理:MCA-SEVNLDAEFR-K (Dnp)-RR, Amide 常用于作为基质金属蛋白酶(MMPs)的底物 。MMPs 是一类锌离子依赖的蛋白水解酶家族,在细胞外基质重塑、组织修复、炎症反应、肿瘤侵袭和转移等生理病理过程中发挥重要作用 。当 MMPs 作用于该多肽时,会特异性切割多肽中的特定肽键(如 Phe - Arg 键),使带有荧光基团 MCA 的片段与其他部分分离 。由于 MCA 在游离状态下荧光强度远高于与多肽连接时的荧光强度,因此可通过检测荧光强度的变化,定量分析 MMPs 的活性 。这种荧光共振能量转移(FRET)原理的应用,使该多肽成为研究 MMPs 活性和筛选 MMPs 抑制剂的重要工具 。
  • 研究进展:在肿瘤研究领域,MMPs 的异常表达与肿瘤细胞的侵袭和转移密切相关。利用 MCA-SEVNLDAEFR-K (Dnp)-RR, Amide 作为底物检测 MMPs 活性,有助于探究肿瘤细胞侵袭转移的机制,并筛选潜在的抗肿瘤药物 。在心血管疾病研究中,MMPs 参与血管壁细胞外基质的代谢和重构,该多肽可用于研究 MMPs 在动脉粥样硬化、血管再狭窄等疾病发生发展中的作用 。此外,在炎症性疾病研究中,通过监测 MMPs 活性变化,分析炎症反应对组织细胞外基质的影响 。

4. 溶解保存

  • 溶解:该多肽可尝试先溶于水,若溶解性不佳,可加入少量的二甲基亚砜(DMSO)助溶,一般 DMSO 的使用浓度不宜超过 5%(v/v),以避免对后续实验细胞或反应体系产生毒性 。也可使用 0.1% 的三氟乙酸(TFA)水溶液进行溶解 。溶解过程中,可通过轻柔涡旋、超声等方式加速溶解 。在溶解后,需根据实验要求进一步稀释,确保其浓度准确 。
  • 保存:干粉状态下,应密封保存在 -20℃或更低温度环境中,可保存 1 - 2 年 。溶解后的多肽溶液建议分装保存,避免反复冻融, -80℃可保存 3 - 6 个月, -20℃可保存 1 - 3 个月 。保存时需注意避光,防止荧光基团 MCA 受到光照影响而降解 。

5. 相关多肽

  • MCA - RPPGFSAFK(Dnp) - R - NH₂:同样是基于荧光共振能量转移原理设计的 MMPs 底物多肽,常用于检测 MMP - 2 和 MMP - 9 的活性 。与 MCA-SEVNLDAEFR-K (Dnp)-RR, Amide 相比,两者氨基酸序列不同,切割位点也存在差异,可用于研究不同 MMPs 亚型的底物特异性 。
  • Dabcyl - KTSAVLQSGFRK(Dnp) - EDANS:属于荧光共振能量转移底物多肽,用于检测其他蛋白酶如组织蛋白酶 B 的活性 。其作用原理与 MCA-SEVNLDAEFR-K (Dnp)-RR, Amide 类似,但标记的荧光基团和淬灭基团不同,可通过对比研究,了解不同标记系统在蛋白酶活性检测中的特点和应用范围 。

6. 相关文献

  • Nagase, H., & Woessner, J. F. (1999). Matrix metalloproteinases. Journal of Biological Chemistry, 274(31), 21491 - 21494.
  • Visse, R., & Nagase, H. (2003). Matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases: structure, function, and biochemistry. Circulation Research, 92(8), 827 - 839.

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