Calcein Red,AM,染色的具体步骤

Calcein Red,AM,染色的具体步骤
参数信息

同义名:Calcein Red Acetoxymethyl ester钙黄绿素红乙酰甲酯;

分子量:1015.79

纯度:≥95%(HPLC)

Ex/Em:560/574nm

溶解性:溶于DMSO(1~5mM)

储存条件:-20℃避光干燥

生产厂商:西安强化生物科技

简单概述

本品是Calcein Red,AM,自身无荧光,具有细胞膜渗透性。

一旦进入细胞后,被细胞内酯酶水解为钙黄绿素红(Calcein Red),能与胞内钙离子结合,产生强烈的红色荧光(Ex/Em=560/574),用标准的TRITC/Cy3滤片设置检测。

染色步骤

大多数实验中Calcein Red AM的工作浓度为2-5μM。

由于不同细胞系的染色条件不同,初次实验建议做梯度实验,以确定Calcein Red AM的工作浓度,使用低探针浓度得到的荧光结果为筛选原则。

(1)取一管适量分装的储存液(1000×)置于室温,至少回温20min,低速离心后,用合适的缓冲液如PBS,HBSS-HEPES稀释到1×染色工作液。

(2)对于贴壁细胞,先用胰酶-EDTA消化细胞,离心收集细胞(1000 rpm,3min)。对于悬浮细胞,直接离心收集细胞。

(3)去上清,用缓冲液清洗细胞2~3次,充分去除残留的酯酶活性。

jrhz.info

(4)用1/10细胞培养基体积的Calcein Red AM染色工作液重悬细胞,37℃孵育20min~1h。

(5)用PBS(或者其他缓冲液)洗涤细胞两次去除多余染料。

(6)用含合适滤光片(Ex/Em= 560nm/574nm)的仪器进行检测。

相关试剂

FITC-Streptavidin

PE-Streptavidin

Cy3-Streptavidin

Cy2-Streptavidin Cy2

Alexa Fluor 405-Streptavidin

Alexa Fluor 488-Streptavidin

Alexa Fluor 555-Streptavidin

Alexa Fluor594-Streptavidin

TPEN,Heavy Metal Chelator重金属螯合剂

ZnAF-2F DA,Cell Permeant锌离子荧光探针

Rhod-2,AM,Cell Permeant钙离子荧光探针

Human Dil-Oxidized Low Density Lipoprotein

以上资料由西安强化生物科技有限公司xxn整理!

本试剂仅适用于科研实验,敬请知悉。

特别声明:[Calcein Red,AM,染色的具体步骤] 该文观点仅代表作者本人,今日霍州系信息发布平台,霍州网仅提供信息存储空间服务。

猜你喜欢

星舰成功率44%,NASA拍特朗普马屁,明年发探测器,后年载人登月(星舰技术难度)

2019年正值特朗普第一次当美国总统期间,当时规划是在2024年之前让美国宇航员重返月球,定在2024年之前,是因为2019年特朗普还很自信,认为自己一定能连任,若2025年成功连任,其第二个任期结束日期是2…

星舰成功率44%,NASA拍特朗普马屁,明年发探测器,后年载人登月(星舰技术难度)

跨越时空的魅力交响(跨越时空的魅力这本书谁写的)

时尚服装,恰似一首跨越时空的华丽乐章,在历史的长河中奏响独特的旋律,于现代社会的舞台上演绎多元的风采,它是人类创造力与审美情趣的璀璨结晶。 时尚服装,以其跨越时空的魅力,连接着过去与现在,融合着多元的文化,表…

跨越时空的魅力交响(跨越时空的魅力这本书谁写的)

宋亚轩回应长灯牌:在追星中把握边界感(宋亚轩发言)

但宋亚轩的这个回应,对一些粉丝而言,似乎就像是不领情的表现。但大家有没有想过,当偶像在台上表演时,他们更希望看到观众专注于欣赏演出的神情。这样不仅能让偶像在舞台上充分展现自己,粉丝们也能获得更好的追星体验,大…

宋亚轩回应长灯牌:在追星中把握边界感(宋亚轩发言)

玉米棒生长模拟器(玉米棒生长模拟视频)

def __init__(self, variety="普通玉米", seed_quality=0 8): selfmoisture_content = 0 85 # 初始含水量 self environ

玉米棒生长模拟器(玉米棒生长模拟视频)

MV|成龙梁家辉《捕风追影》发布插曲《狼群的规矩》,第二轮超前点映明日开启(梁家辉成仁)

暑期档动作犯罪爽片《捕风追影》今日宣布将于8月4日至8月8日的19:00至22:00开启20城超前点映,同时发布插曲《狼群的规矩》MV。 超前点映中,除了成龙和梁家辉表现老到,张子枫、此沙、文俊辉等年轻演员…

MV|成龙梁家辉《捕风追影》发布插曲《狼群的规矩》,第二轮超前点映明日开启(梁家辉成仁)