赛默飞3113111371CO₂培养箱灭菌

赛默飞CO₂培养箱灭菌程序详解

一、引言

CO₂培养箱是现代生命科学研究中关键的实验设备，主要用于细胞、组织以及微生物的体外培养。为了保障实验结果的可靠性与样品的生物安全，控制污染是使用过程中必须面对的重要问题。污染可能来源于空气颗粒、水盘、操作失误、培养容器渗漏或前一次实验残留的微生物。

为应对这些潜在风险，许多CO₂培养箱厂商在产品中内置自动灭菌程序，赛默飞（Thermo Fisher Scientific）作为行业内的重要厂商，其多款培养箱型号均集成了高温自动灭菌功能，便于用户定期对箱体内部环境进行灭菌消毒。

本文将详细介绍赛默飞培养箱中典型的灭菌程序，主要以️Heracell VIOS系列和️Forma Steri-Cycle系列为代表，说明其工作机制、执行流程、安全注意事项与维护要点。

二、灭菌方式分类

赛默飞培养箱常见的灭菌方式包括以下几种：

1. 高温湿热灭菌（自动）

多数中高端赛默飞培养箱（如Heracell VIOS、Steri-Cycle）内置️高温湿热灭菌程序，可将内腔温度提升至️180°C或140°C并保持一定时间（通常为️6~12小时），以达到彻底灭菌效果。

该方式模拟实验室高压灭菌锅中的湿热灭菌原理，适合杀灭细菌、真菌、芽孢等常见污染源。

2. 紫外线杀菌（部分型号）

个别型号（如早期Heracell 150i）配备️UV紫外杀菌灯，用于水盘或空气通道中短时间灭菌。该方式成本较低，但灭菌范围有限，主要适用于️抑制微生物滋生，而非彻底清除污染。

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3. 手动化学灭菌（非自动程序）

对于无自动灭菌功能的培养箱，如Thermo 311、160i等，需用户️使用酒精、次氯酸钠、过氧化氢蒸汽等消毒剂对内腔进行擦拭和喷洒，杀灭残留微生物。这种方式操作简便，但对操作规范和人员经验有一定依赖。

三、高温自动灭菌程序详解（以Heracell VIOS为例）

1. 灭菌机制

Heracell VIOS系列培养箱采用️高温空气对流灭菌技术，程序设定为在️180°C ±5°C条件下连续运行️6小时，灭菌期间系统将自动关闭所有传感器与气体供应，完全由程序接管控制。

灭菌对象包括：

• 内胆结构
• 搁板、支架
• 门封胶条（耐高温硅胶材质）
• HEPA空气过滤模块（耐热结构）
• 风扇系统（高温兼容）

此类灭菌程序已通过验证，满足实验室微生物清除标准（如EN 285、ISO 17665）。

2. 程序启动条件

• ️内部清空：所有培养皿、培养瓶、液体容器必须移出。
• ️附件拆卸：如CO₂检测管、外接探头等敏感配件需断开或保护。
• ️门封检查：检查门封是否贴合，防止高温泄漏。
• ️电源稳定：灭菌程序全程需稳定供电，不可中断。

3. 操作步骤

以下以Heracell VIOS 160i为例：

1. ️进入系统设置

• 从主菜单选择“Sterilization”功能。
• 系统会自动检查当前状态是否符合灭菌要求（温度、门状态、内部负载等）。

1. ️确认操作

• 屏幕提示确认是否开始灭菌。
• 用户需输入管理员密码（如已设定），确认执行操作。

1. ️灭菌过程

• 升温阶段（1.5小时）：温度逐步提升至180°C。
• 保温阶段（6小时）：维持180°C恒温灭菌。
• 冷却阶段（3小时以上）：系统自动降低至安全开启温度。

1. ️结束提示

• 灭菌完成后，设备提示“Cycle Complete”。
• 系统记录本次灭菌日志，可通过屏幕或数据接口导出。

1. ️重新配置

• 恢复CO₂连接。
• 安装内部附件。
• 运行空载测试，确认温度与气体控制功能恢复正常。

4. 灭菌周期建议

• 常规实验室使用：每1-2个月执行一次。
• 出现污染事件后：立即执行1次灭菌。
• 长时间停机后重新使用前：建议先运行1次灭菌。

四、安全注意事项

高温自动灭菌虽操作便利，但仍需注意以下几点：

1. 避免人员接触设备表面

灭菌运行期间设备外壳温度可能升高，操作人员应远离，避免烫伤。

2. 严禁夹带液体或塑料器皿灭菌

非耐热器具在高温下可能融化或爆裂，导致污染或设备损坏。

3. 灭菌完成前不得强行断电或开门

中途干预可能导致灭菌失败、系统损坏或热气泄露伤人。

4. 不得高频率运行灭菌程序

连续灭菌会加速电子元件老化，建议间隔至少两周以上。

五、常见问题与解决建议

问题描述可能原因解决方案灭菌程序启动失败内部残留样品、门未关闭清空腔体，重新确认门状态灭菌后设备不供气或报警系统未恢复CO₂供气模式手动切换至“运行模式”门封变形或密封不良多次高温灭菌导致老化更换耐高温门封灭菌完成后显示温度未恢复室温过高或风扇运转不良延长冷却时间，检查风扇状态灭菌日志无法导出USB接口未识别或文件格式不兼容更换存储设备或咨询厂商支持

六、无自动灭菌功能型号的消毒建议

如Thermo 311、160i等型号无内置灭菌程序，可参考以下人工灭菌流程：

1. 物理清洁

• 用70%乙醇擦拭腔体、搁架、门封等部位。
• 清洗水盘并高温高压灭菌（或使用消毒液浸泡）。

2. 化学消毒

• 使用0.5%-1%次氯酸钠溶液擦拭后静置15分钟，再用清水擦干。
• 使用3%过氧化氢喷洒后关闭门30分钟。

3. 紫外辅助

• 如有条件，可用便携式UV灯对内腔照射15分钟以上。

七、维护与记录建议

为了保持培养箱在长期运行中的洁净性与稳定性，推荐建立灭菌与维护记录：

日期灭菌方式责任人效果备注2025-05-01自动高温180℃张三无异常，运行正常2025-03-20手动化学消毒李四略有霉点已清除

• 建议张贴“灭菌记录表”于设备侧面或实验记录本中。
• 若用于临床或GMP要求环境，应配合SOP文档执行。

八、总结

赛默飞培养箱配备的自动高温灭菌程序是提升实验洁净度、降低污染风险的重要工具。通过高温对整腔系统进行定期杀菌，可减少微生物残留，提高培养环境的可控性，尤其适合对细胞活性要求较高的科研项目。操作过程中需严格遵守程序与安全指引，避免误操作带来的设备损坏与人身伤害。

对于不具备自动灭菌功能的机型，也可通过科学的化学消毒手段结合日常维护，维持培养箱的清洁状态。