保存条件:避光、-20°C储存,避免反复冻融
溶解性:可溶于部分有机溶剂(如DMSO、DMF等)
英文名称:Cy3-OH,Cyanine3 Hydroxyl
中文名称:花菁素Cy3-羟基
CAS:400763-55-5
分子式:C29H37N2O2+
分子量:445.63
规格:5mg、10mg、25mg
纯度:95%+
核心结构:属于花菁染料家族,包含共轭双键体系,末端修饰羟基(-OH)。
羟基功能:
反应活性较低,需活化后与羧基(-COOH)形成酯键,或转化为氨基(-NH2)等活性基团。
可通过化学修饰实现与生物分子的共价偶联。
光谱与荧光性质
吸收/发射波长:
(吸收):550 nm。
(发射):565–570 nm。
光学参数:
摩尔消光系数:高达15.0×10⁵ M⁻¹cm⁻¹。
荧光量子产率:0.15–0.30。
光稳定性:优于传统染料,引入羟基后抗光漂白能力提升。
环境敏感性:
pH依赖性:荧光强度可能随pH变化。
溶剂相容性:溶于DMF、DMSO、甲醇等有机溶剂,微溶于水。
三、标准操作流程(以抗体标记为例)(一)实验准备
试剂配制:
将Cy3-OH溶解于无水DMF中,配制成10 mM储备液。
标记缓冲液:0.1 M碳酸氢钠缓冲液(pH 8.5)或PBS(pH 7.4)。
生物分子处理:
抗体/蛋白需浓缩至≥1 mg/mL,超滤离心去除杂质。
(二)标记步骤
活化Cy3-OH(关键步骤):
取10 mM Cy3-OH/DMF溶液,加入EDC和NHS,室温避光反应30分钟。
偶联反应:
将活化的Cy3-酯滴加至抗体溶液中。
37℃避光振荡反应1-2小时。
纯化与终止:
加入1 M Tris-HCl(pH 8.0)终止反应(终浓度50 mM)。
超滤离心(12,000×g,10分钟)去除游离染料,用PBS洗涤3次。
产物定量:
紫外-可见光谱检测:Cy3特征吸收峰(555 nm)计算标记效率。
注:若标记核酸(如DNA探针),需先将Cy3-OH转化为氨基衍生物,再与修饰的核酸反应。
四、关联试剂AF 700 WGA
AF 633 WGA
Cy5.5 WGA
Cy7 WGA
PerCP-WGA
Rhodamine 110 Chloride
Tetramethylrhodamine WGA
四甲基罗丹明小麦胚芽凝集素
辣根过氧化物酶标记的番茄凝集素
CF 680 LEL;CF 680标记的番茄凝集素
BC Maleimide;BC Mal;BC马来酰亚胺
Dy510-XL acid;811785-95-2;Dy510-XL羧酸
HRP CTB;辣根过氧化物酶标记的霍乱毒素 B 亚基
HRP LEL;Horseradish Peroxidase Tomato lectin
195136-52-8;OG488 COOH;OG488 acid;OG488 羧酸
DY520XL-tyramide.TEA;DY520XL-TSA.TEA;DY520XL tyramide triethylamine salt
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