Tide Quencher 2WS酸的反应条件

Tide Quencher 2WS酸的反应条件

Tide Quencher 2WS酸是一种功能强大的非荧光型淬灭剂，具有良好的水溶性和宽吸收波段，常用于荧光免疫分析（FIA）、荧光原位杂交（FISH）、分子成像以及生物标记等领域。作为一种高效暗淬灭剂，TQ2WS酸能够通过荧光共振能量转移（FRET）机制有效淬灭多种可见光到近红外波段的荧光染料，极大降低背景信号，提高检测灵敏度和准确性。

一、化学性质与水溶性

TQ2WS酸分子结构中包含多个磺酸基团（–SO3H），赋予其极佳的水溶性和生物相容性，能够在生物缓冲液及体液环境中保持稳定。其最大吸收波长位于可见光至近红外区域，适合与多种荧光染料形成有效的淬灭对。

二、典型反应条件

TQ2WS酸的活性羧基使其能够与含有胺基的生物大分子（如抗体、蛋白质、多肽）通过酰胺键共价结合，构建功能化的荧光探针或免疫试剂。其典型反应步骤和条件如下：

活化步骤

将TQ2WS酸溶于无水有机溶剂（如DMF或DMSO）中。

添加N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）和碳二亚胺类活化剂（如EDC或DCC），在室温下搅拌反应1-2小时，生成TQ2WS-NHS活性酯。

该反应需在无水条件下进行，以避免活性酯水解。

偶联步骤

将活化的TQ2WS-NHS酯溶液缓慢加入含有目标蛋白或抗体的缓冲液（通常为pH 7.2–8.5的PBS或碳酸盐缓冲液）。

反应体系温和（4–25℃），孵育数小时至过夜，以实现胺基与活性酯的高效偶联。

反应过程中应避免剧烈搅拌和强光照射，防止蛋白质变性和荧光分子光漂白。

纯化和去除游离试剂

反应结束后，利用透析、凝胶过滤柱或超滤等方法去除未反应的淬灭剂和小分子杂质。

纯化后的标记物适合用于后续的免疫分析和成像实验。

产品名称：Tide Quencher 2WS酸

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：齐岳生物

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