人巨噬细胞刺激 1(MST1)ELISA 试剂盒|茁彩生物(巨噬细胞刺激因子和人表皮生长因子的区别)

人巨噬细胞刺激 1(MST1)ELISA 试剂盒|茁彩生物(巨噬细胞刺激因子和人表皮生长因子的区别)

巨噬细胞刺激 1(Macrophage Stimulating 1,MST1),又称肝细胞生长因子样蛋白(Hepatocyte Growth Factor - like Protein,HGFL),是一种分泌型糖蛋白,在人体多种组织中均有表达,如肝脏、肾脏、胎盘、脾脏以及免疫细胞等。

MST1 的基因定位于人类特定的染色体上,其编码的蛋白质前体经过加工后形成具有生物活性的成熟分子。成熟的 MST1 含有多个结构域,这些结构域使其能够与相应的受体结合并发挥生物学功能。在正常生理状态下,MST1 的表达处于一定水平,而在组织损伤、炎症反应等病理状态下,其表达水平会发生显著变化,以参与机体的病理生理过程调节。

生理功能

巨噬细胞刺激 1(MST1)具有多种重要的生理功能,涉及免疫调节、细胞存活与凋亡、组织修复等多个方面。

在免疫调节方面,MST1 对巨噬细胞具有显著的刺激作用,能够促进巨噬细胞的迁移、增殖和活化,增强其吞噬能力和细胞因子的分泌,从而参与机体的免疫防御和免疫监视过程。同时,它还可以调节其他免疫细胞的功能,如 T 淋巴细胞、B 淋巴细胞等,在适应性免疫应答中发挥一定的作用。

在细胞存活与凋亡调控中,MST1 能够通过与特定受体结合,激活下游的信号通路,抑制细胞凋亡,促进细胞的存活和增殖。这一功能使其在组织的生长发育和损伤修复过程中具有重要意义,例如在肝脏损伤时,MST1 可能参与肝细胞的再生和修复。

此外,MST1 还与肿瘤的发生发展存在一定的关联。研究表明,在部分肿瘤组织中,MST1 的表达异常,可能通过促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移,以及调节肿瘤微环境等方式影响肿瘤的进展。同时,MST1 在血管生成过程中也可能起到一定的调节作用,参与组织的血液供应维持。

检测原理

ZC-57990 人巨噬细胞刺激 1(MST1)ELISA 试剂盒的检测原理基于酶联免疫吸附试验(ELISA)的基本原理,即利用抗原与抗体的特异性结合反应实现对 MST1 的定量检测。

该试剂盒的微孔板预先包被有抗人 MST1 的特异性捕获抗体。当加入待检测的人源样品(如血清、血浆、细胞培养液、组织匀浆等)时,样品中的 MST1 会与微孔板上的捕获抗体特异性结合,形成抗原 - 抗体复合物。经过洗涤步骤去除未结合的杂质后,加入酶标记的抗人 MST1 检测抗体,该检测抗体可与已结合在捕获抗体上的 MST1 再次特异性结合,形成 “捕获抗体 - MST1 - 酶标检测抗体” 的夹心复合物。再次洗涤去除未结合的酶标检测抗体后,加入底物溶液,酶会催化底物发生显色反应。显色的深浅与样品中 MST1 的含量呈正相关,通过酶标仪在特定波长下测定吸光度值,再与已知浓度的 MST1 标准品绘制的标准曲线进行对比,即可计算出样品中 MST1 的浓度。

检测步骤

  1. 样品准备:收集待检测的人源样品,如血清、血浆、细胞培养液、组织匀浆等。按照试剂盒说明书的要求对样品进行预处理,如组织匀浆需离心取上清、细胞培养液需过滤去除细胞碎片、血清和血浆需进行适当稀释等,以保证样品的纯度和均一性。同时,准备好不同浓度的 MST1 标准品。
  2. 加样:将标准品、空白对照(一般为样品稀释液)和待检测样品分别加入到包被有捕获抗体的微孔板中,每个浓度或样品设置 3 - 4 个复孔。加盖后,在 37℃条件下孵育 1 - 2 小时,使 MST1 与捕获抗体充分结合。
  3. 洗涤:孵育结束后,弃去孔内液体,用洗涤液反复洗涤微孔板 5 次左右,每次洗涤后将微孔板倒扣在吸水纸上拍干,彻底去除未结合的物质。
  4. 加酶标检测抗体:向每个微孔中加入适量的酶标记检测抗体,加盖后在 37℃下孵育 1 小时,使酶标检测抗体与夹心复合物中的 MST1 特异性结合。
  5. 再次洗涤:按照步骤 3 的方法再次洗涤微孔板,去除未结合的酶标检测抗体。
  6. 加底物:向每个微孔中加入底物溶液,37℃避光孵育 15 - 30 分钟,此时酶催化底物显色,溶液逐渐变为蓝色。
  7. 终止反应:当显色达到适当程度时,向每个微孔中加入终止液,反应终止,溶液颜色由蓝色变为黄色。
  8. 测定吸光度:在终止反应后的 15 分钟内,使用酶标仪在试剂盒规定的波长(如 450nm)下测定各微孔的吸光度值。
  9. 结果计算:根据标准品的浓度和对应的吸光度值,采用线性回归等方法绘制标准曲线。根据样品的吸光度值,从标准曲线上查得对应的 MST1 浓度,再结合样品的稀释倍数等参数,计算出样品中 MST1 的实际含量。

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