Sulfo-Cy2-BSA,水溶性-Cy2-牛血清白蛋白的化学反应原理
Sulfo-Cy2-BSA 是一种通过将水溶性磺化Cyanine2(Sulfo-Cy2)荧光染料共价标记到牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)上的复合物,广泛应用于蛋白质的标记和检测研究中。该标记物结合了BSA优良的生物相容性与Sulfo-Cy2染料的高荧光性能,能够实现高效、稳定的蛋白质示踪和分析。
在化学反应原理方面,Sulfo-Cy2通常以其羧基活性酯形式(如NHS酯,N-羟基琥珀酰亚胺酯)存在,使其能够与蛋白质上的游离氨基发生共价结合。具体而言,BSA蛋白表面含有多个赖氨酸残基,其ε-氨基为亲核性官能团,能与Sulfo-Cy2-NHS酯中的活性酯发生亲核取代反应。该反应在碱性或接近中性的缓冲液(pH约7.5-8.5)条件下进行,确保氨基的活性及反应效率。
反应机理首先是活性酯的碳酰碳原子被BSA赖氨酸氨基亲核进攻,形成过渡态,随后NHS基团离去,生成稳定的酰胺键。该共价酰胺键使Sulfo-Cy2染料牢固地连接于BSA分子上,避免了非共价结合可能引起的染料脱落或信号波动。此偶联方式简洁高效,反应时间短且产率高。
磺酸基团的引入赋予Sulfo-Cy2染料良好的水溶性和较低的非特异性吸附,使标记后的Sulfo-Cy2-BSA复合物在水性环境中表现出均匀的分散性和稳定的光学性质。同时,该结构避免了染料在蛋白质表面聚集导致的荧光淬灭,保证了标记分子的高量子产率和亮度。
该标记过程的关键在于控制反应条件和标记比例,以避免过度修饰对BSA构象和功能的影响,同时实现理想的染料负载量。通常,标记后的Sulfo-Cy2-BSA可以通过凝胶过滤色谱或透析等方法去除未反应的游离染料,提高产物纯度和实验的重复性。
Sulfo-Cy2-BSA的化学稳定性强,且在光照和储存条件下表现出良好的荧光稳定性,适合用于多种蛋白质检测技术,如免疫印迹、酶联免疫吸附实验(ELISA)、流式细胞术和荧光成像等。通过荧光信号的强度和分布,可以实现对目标蛋白质的定量分析和空间定位。
总的来说,Sulfo-Cy2-BSA通过Sulfo-Cy2-NHS酯与BSA表面赖氨酸氨基的酰胺键形成反应,实现了稳定高效的蛋白质荧光标记。其水溶性优良、反应条件温和、标记稳定性好,为蛋白质相关的化学分析和生物学研究提供了强有力的工具支持。
产品名称:Sulfo-Cy2-BSA,水溶性-Cy2-牛血清白蛋白
纯度:95%+
规格:mg/g
厂家:齐岳生物
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仅用于科研,不能用于人体。小编axc