3-硝基酪氨酸-过氧化物酶标记物介绍
产地:西安瑞禧生物可提供
包装:mg以及g级
用途:科学研究
3-硝基酪氨酸(3-Nitrotyrosine, 3-NT)是一种由酪氨酸在氧化应激条件下,通过活性氮氧化物介导的硝基化修饰产生的分子标志,广泛用作蛋白质氧化损伤的生物标志物。3-硝基酪氨酸的检测对研究氧化应激、炎症反应及相关疾病如神经退行性疾病、心血管病和癌症的机制具有重要意义。我们提供这个产品,仅供科研,如有需要,欢迎咨询!
在生物检测中,3-硝基酪氨酸过氧化物酶标记物(3-NT-HRP)是指将3-硝基酪氨酸作为抗原,结合过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)作为酶标记的复合物。HRP是一种常用的酶标记物,具备高效的催化能力,能够将底物如3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)氧化产色,广泛用于酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫组化技术。
一、3-硝基酪氨酸-过氧化物酶标记物的结构与功能
该标记物通过化学偶联技术,将3-硝基酪氨酸修饰的肽或蛋白与HRP偶联。偶联后,3-NT作为靶向识别位点,HRP提供信号放大功能,实现高灵敏度的检测。其核心特点包括:
特异性识别:3-NT为氧化应激特征性标志,可识别体内受损蛋白的硝基化修饰。
信号放大:HRP催化底物反应,产生易于检测的显色信号,增强检测灵敏度。
应用广泛:适用于ELISA、免疫印迹(Western blot)、免疫组化等多种分析平台。
二、合成与制备
3-NT-HRP标记物的制备一般采用交联剂(如Glutaraldehyde、EDC/NHS等)将3-硝基酪氨酸修饰的抗原与HRP酶进行共价偶联。关键步骤包括:
3-硝基酪氨酸抗原的合成或提取,保证特异性。
HRP的活性保护,避免酶活损失。
优化偶联比例,确保标记物的结合能力和催化活性兼顾。
纯化和鉴定,通过SDS-PAGE、电泳和酶活性测定确认标记物的质量。
三、应用价值
氧化应激相关疾病检测
3-NT-HRP标记物可敏感检测血清、细胞或组织中的3-硝基酪氨酸修饰蛋白水平,有助于评价疾病状态和疗效监测。
生物标志物研究
通过特异性免疫检测,揭示蛋白质硝基化在心血管疾病、阿尔茨海默症及肿瘤中的作用机制。
药物筛选和机制研究
用于筛选抗氧化药物,评估其对蛋白质硝基化的抑制作用。
四、优势与挑战
优势:
高灵敏度和特异性,适合微量样本检测。
兼容多种检测方法,易于操作。
挑战:
偶联反应条件需严格控制,避免酶活性损失。
3-硝基酪氨酸修饰蛋白的多样性可能影响抗体识别一致性。
背景信号需优化以提高准确度。
五、发展前景
随着氧化应激在疾病研究中的重要性日益凸显,3-硝基酪氨酸-过氧化物酶标记物将成为基础和临床研究中不可或缺的工具。未来,结合新型纳米材料和高通量检测技术,有望实现更高灵敏度、更快速的3-NT检测,助力疾病早期诊断和精准治疗。
3-硝基酪氨酸-过氧化物酶标记物广泛用作蛋白质氧化损伤的生物标志物
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