吲哚菁绿-琥珀酰亚胺酯ICG-NHS,细胞标记专用步骤大公开!(吲哚菁绿作用)

吲哚菁绿-琥珀酰亚胺酯ICG-NHS,细胞标记专用步骤大公开!(吲哚菁绿作用)
一、物化性质

保存条件:避光、-20°C储存,避免反复冻融

溶解性:溶于水以及部分有机溶液。

英文名称:ICG-NHS

中文名称:吲哚菁绿-琥珀酰亚胺酯

分子式:C49H53N3O7S

分子量:828.03

CAS号:1622335-40-3

外观形态:绿色粉末

Emission (Em):814

Excitation (Ex):789

规格:5mg,10mg,25mg

纯度:95%+

二、功能特性

光学性质:

近红外荧光:吸收波长约780 nm,发射波长820–830 nm,穿透组织能力强(>1 cm),背景干扰低,适合深部组织成像。

光稳定性:对光、热稳定性高,可长期保存。

反应活性:

NHS酯基团可与生物分子的 伯氨基在温和条件(pH 7.2–8.5)下快速反应,形成稳定酰胺键,实现高效共价标记。

溶解性与生物相容性:

可溶于水及有机溶剂(DMSO、甲醇),水溶性优化后适用于生理环境。

低毒性、无免疫原性。

三、细胞标记专用步骤

细胞处理:

培养细胞至对数生长期,用PBS洗涤。

标记操作:

将ICG-NHS工作液加入细胞培养基(终浓度需优化),避光孵育30分钟至数小时。

注意:避免pH过高(防非特异性结合)。

洗涤与成像:

用PBS洗涤3次,去除游离染料。

荧光显微镜观察:近红外激发(780 nm),发射波长820 nm。

四、关联试剂

ICG-Maleimide

Boc-Gly-Gly-PAB

Pyrromethene 597

Cyanine3 Streptavidin

ICG-NHS ester,ICG SE

Sulfo-Cyanine7.5 azide

Sulfo-Cyanine7.5 carboxylic acid

Cy3 NHS ester,Cyanine3 NHS ester

Cyanine7.5 Tyramide,Cy7.5 Tyramide

Azidoethyl-SS-propionic NHS ester

(本文内容由陕西新研博美生物科技有限公司木南整理)

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