一、试剂介绍
这个名字本身就是一个精确的蓝图，展示了一个分子如何同时提供两种不同的、正交的化学反应性，从而允许研究人员以可控、有序的方式连接两个不同的分子。
N₃-C₅-NHS ester 的威力在于其正交的反应性：两个反应手柄互不干扰，允许分步进行偶联。
典型的“桥梁搭建”流程如下：
步骤一：NHS酯端连接（固定“桥墩A”）
将 N₃-C₅-NHS ester 与含有伯氨基的第一个分子（例如：一个蛋白质、一个胺修饰的纳米颗粒或一个带有氨基的靶向配体）反应。
NHS酯与氨基反应，形成稳定酰胺键，从而将整个连接分子（包括叠氮基团）共价连接到“分子A”上。此时，产物是 “分子A-C₅-N₃”。这一步通常在水溶液中进行，然后纯化以去除多余的连接剂。
步骤二：点击化学端连接（连接“桥墩B”）
将上述纯化后的产物 “分子A-C₅-N₃”，与含有炔基的第二个分子（例如：一个荧光染料-炔烃、一个生物素-炔烃、一个小分子药物-炔烃，或另一个带有炔基的蛋白质）混合。
在适当的点击化学反应条件下（加入铜催化剂，或使用环辛炔等应变炔进行无铜点击），叠氮基团与炔基发生环加成反应，形成共价连接。
最终产物：成功将分子A与分子B通过一个含有柔性C₅间隔臂的链接桥连接起来，形成 A-C₅-点击化学连接键-B。
选择与考量
间隔臂长度：C₅提供中等长度和柔性。也有其他变体，如 N₃-C₂-NHS ester（短臂）或 N₃-C₁₂-NHS ester（长臂），可根据需要连接的两个分子的空间要求进行选择。
反应顺序：原则上也可以颠倒顺序，先进行点击反应，再进行NHS酯反应，但通常先进行经典的、条件稍剧烈的NHS酯反应并纯化，再进行更温和的点击反应是更优策略。
二、试剂属性
中文名称：叠氮-C5-琥珀酰亚胺酯
英文名称：N3-C5-NHS ester，Azido-Aca-NHS
CAS：866363-70-4
分子式：C10H14N4O4
分子量：254.2
纯度：≥95%
外观：固体
品牌：陕西新研博美生物科技有限公司
溶解性：常溶于 DMSO,DMF
储存条件：建议在-20℃下干燥、避光保存，并尽量避免频繁解冻冻融，现配现用为佳
规格：1mg，5mg，10mg
结构式：
三、相关试剂
Biotin-PEG4-Amine-C6-Azide，生物素-四聚乙二醇-氨基-C6-叠氮
Desthiobiotin-C4-oxyamine，脱硫生物素-C4-羟胺
Biotinyl Cystamine，生物素半胱胺
Biotin-PEG3-SCO-PPh3，生物素-三聚乙二醇-SCO-PPh3
Biotin-C3-PEG3-C3-NH2，生物素-C3-三聚乙二醇-C3-氨基
Bis-PEG13-NHS ester
Bis-PE21 NHS ester
Bis-PEG4-NHS ester
Bis-PEG2-NHS ester
Bis-PEG5-NHS ester
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该试剂只用于科研实验，不能用于人体。
