标签肽：Hexa-His；64134-30-1(标签蛋白原理)

Hexa-His (6X His Tag) 是一种常用的亲和标签，由六个组氨酸残基组成。HEXA-HIS 可以与含有镍离子 (Ni2+) 或钴离子 (Co2+) 等过渡金属离子的亲和层析介质结合，从而用于蛋白质的纯化。

一、基本信息

分子量：840.85

分子式：C36H44N18O7

cas号：64134-30-1

性状：固体

颜色：白色至类白色

序列：HHHHHH

溶解度：H2O 中的溶解度 : 50 mg/mL (59.46 mM; 超声助溶)

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二、体外研究

Hexa-His 用于蛋白纯化和蛋白分析

(1) 构建含有目的基因和 Hexa-His 标签的质粒并转入大肠杆菌中。

(2) 挑选阳性克隆，在 LB 培养基中培养至 OD 600 约为 0.6-0.8 后，加入 IPTG 诱导剂，继续培养几小时以诱导目标蛋白的表达。

(3) 收集细菌细胞，用裂解缓冲液重悬并超声破碎细胞，离心去除碎片得到上清液。

(4) 装填好 Ni-NTA 亲和层析柱，将裂解后的上清液缓慢通过 Ni-NTA 柱，使带有 Hexa-His 标签的 CTB 蛋白结合到柱子上。

(5) 蛋白质吸附后，使用 10 个柱体积的 60 mM 咪唑的结合缓冲液洗涤树脂。目的基因用 5 个柱体积 1 M 咪唑溶液洗脱。收集蛋白并通过 15% SDS-PAGE 进行分析。

三、注意事项

本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及『化妆品』等用途。